高效液相色谱法测定发酵液中康百汀含量

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普伐他汀(Pravastatin)是一种新型降血脂药,属国家二类新药,其发酵生产是通过稀有马杜拉放线菌(Actinomadura)将康百汀(Compactin)生物转化而成。康百汀发酵液中康百汀以康百汀酸和康百汀内酯两种形式存在,准确快速的检测分析方法直接影响到普伐他汀的质量及生产成本。缩短发酵液中康百汀含量测定时间,减少环境污染是本论文的目的所在。   论文根据康百汀发酵生产特性,摸索出康百汀发酵液提取溶剂及提取时间等条件特征,设计并采用高效液相色谱法对康百汀发酵液进行分析测定试验,初步建立一种快速测定发酵液中康百汀含量的方法,实现了实验室研究与发酵工程技术的有机结合。   论文研究结果表明,当采用高效液相色谱法HysperilODS2色谱柱(250mm×4.6mm,5um),流动相为乙腈:0.03mol·L。磷酸二氢钠缓冲液(1200:800,v/v,pH=4.0),流速为1.0ml·min-1,检测波长为238nm,柱温25℃,进样量10μl时,康百汀发酵液生产中康百汀酸和康百汀内酯分别在9.75~487.68mg·L-1,10.20~509.79mg·L-1内呈良好线性关系,相关系数(r)分别为0.999942和0.999801,平均加样回收率分别为99.6%和99.3%,RSD分别为0.42%和0.29%。连续6个月的试验测定结果表明,本研究课题所得出的方法简单,准确可靠,重现性好,可用于发酵液中康百汀含量的测定。   
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