【摘 要】
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由于抗生素生物合成基因通常成簇存在,克隆其中一个或数个基因有助于全基因簇的克隆,对全基因簇结构和功能的研究有助于阐明尼可霉素的生物合成途径及生物合成的调控机理.在
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由于抗生素生物合成基因通常成簇存在,克隆其中一个或数个基因有助于全基因簇的克隆,对全基因簇结构和功能的研究有助于阐明尼可霉素的生物合成途径及生物合成的调控机理.在这些研究基础肯可能通过代谢工程来提高尼可霉素的产量和主要产生高生物活性组份.圈卷产色链霉菌是尼可霉素产生菌.其预萌发的孢子经诱变后,筛选到3株遗传稳定的尼可霉素生物合成阻断突变株,选择其中的与野生型在形态分化上没有区别的NBB19为受体菌株,通过遗传互补克隆到6kbDNA片段,能NBB19使恢复产生尼可霉素的能力.对6kbDNA片段中的部分片段进行了序列分析.用双功能cosmid-pKC505为载体,构建了圈卷产色链霉菌的基因文库.以所克隆的6kbDNA片段为探针从构建的基因文库中筛选到了3个重组cosmid.以天蓝色链霉菌中白基因whiA基因为探针,从圈卷产色链霉菌中克隆到了同源基因-sawC.序列分析表明sawC由990bp构成,编码一个由327个氨基酸残基组成的蛋白质.SawC与WhiA有90％的一致性,与结核分枝杆菌中RV1423蛋白有70％的一致性.
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