四川省石渠县牦牛源蜱种鉴定及其携带巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体的分子检测

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蜱是一类寄生于脊椎动物体表的专性吸血性寄生虫,目前在全球已经发现800多种蜱,并且已经确定蜱至少能传播217种病原体,包括病毒、细菌和寄生虫等,给人类健康及畜牧业发展带来严重影响。迄今为止,有关石渠县蜱的种类及携带病原情况的资料一片空白,因此本研究旨在掌握石渠县蜱种类及携带病原的种类、感染情况和分子特征,为进一步完善相应的蜱媒病防控措施提供数据支撑。方法:采集石渠县8个地点牦牛体表寄生蜱,对采集到的蜱进行形态学鉴定以及线粒体16S rRNA和COI基因的分子生物学鉴定,并进行系统发育分析。再采用PCR检测技术,分别特异性扩增巴尔通体的gltA和rpoB基因、无形体的16S rRNA基因、立克次体的ompA和ompB基因片段、土拉菌和鼠疫耶尔森菌,并对阳性产物测序,再进行系统发育分析,最后统计分析病原的感染情况。结果:1)蜱种类:共采集1352只蜱,经鉴定为青海血蜱和西藏革蜱,其中青海血蜱394只,占29.13%;西藏革蜱958只,占70.87%,为优势种。2)病原检测结果:PCR检测结果显示,石渠县蜱传巴尔通体、无形体和斑点热群立克次体的阳性率分别为25.96%(351/1352)、15.60%(211/1352)和49.48%(669/1352),而鼠疫耶尔森菌和土拉菌均为阴性。巴尔通体在青海血蜱和西藏革蜱的阳性率分别为47.46%(187/394)、17.12%(164/958);无形体在青海血蜱和西藏革蜱的阳性率分别为14.21%(56/394)、16.18%(155/958);斑点热群立克次体在青海血蜱和西藏革蜱的阳性率分别为57.36%(226/394)、46.24%(443/958)。序列进化分析表明,综合巴尔通体gltA和rpoB基因,共获得2种巴尔通体(Bartonella melophagi、B.grahamii);4种无形体的16S rRNA基因序列(Anaplasma bovis、A.ovis、A.phagocytophilum、Ehrlichia Shiqu1);综合斑点热群立克次体ompA和ompB基因,获得2种斑点热群立克次体(Candidatus.Rickettsia longicornii、R.raoultii)。3)混合感染统计结果:石渠县蜱传巴尔通体与斑点热群立克次体、巴尔通体与无形体、斑点热群立克次体与无形体和巴尔通体、斑点热群立克次体与无形体的混合感染阳性率分别为10.72%(145/1352)、2.96%(40/1352)、10.58%(143/1352)和1.78%(24/1352)。巴尔通体与斑点热群立克次体在青海血蜱和西藏革蜱的混合感染阳性率分别为14.21%(56/394)、9.30%(89/958);巴尔通体与无形体在青海血蜱和西藏革蜱的混合感染阳性率分别为3.81%(15/394)、2.61%(25/958);斑点热群立克次体与无形体在青海血蜱和西藏革蜱的混合感染阳性率分别为9.64%(38/394)、10.97%(105/958);巴尔通体、斑点热群立克次体与无形体在青海血蜱和西藏革蜱的混合感染阳性率分别为3.05%(12/394)、1.25%(12/958)。结论:石渠县存在青海血蜱与西藏革蜱,其中西藏蜱为优势蜱种,分布于本调查中的7个乡(除真达乡),而青海血蜱仅分布于海拔相对较低的半农牧区的3个乡。首次在石渠县蜱体内检测到巴尔通体、无形体与斑点热群立克次体,并存在混合感染。
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