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目的：探讨中药五加皮的抗肿瘤作用及单核细胞的刺激作用，分离纯化五加皮抗肿瘤活性成分，为抗肿瘤新药开发、研制提供科学依据。方法：1. 采用[3H]-TdR掺入法研究五加皮提取物对肿瘤细胞株MT-2、HL-60、Raji、TMK-1和HSC-2体外增殖反应的抑制作用。2. 采用皮下接种肿瘤细胞建立荷瘤小鼠动物模型，通过灌胃法投入五加皮提取物治疗荷瘤小鼠，观察五加皮提取物的体内抗肿瘤作用。3. 用凝胶层析法分离、纯化五加皮抗肿瘤有效成分；用SDS-PAGE电泳进一步分离和确定有效成分的纯度和分子量；用蛋白酶E和NaIO4处理分析有效成分的化学组成。4. 用流式细胞技术和蛋白印迹技术进行五加皮抗肿瘤作用机制探讨。5. 用[3H]-TdR掺入法检测五加皮提取物对单核细胞吞噬功能的影响，分别用生物法和ELISA法检测单核细胞因子TNF-α和IL-12的产生，并用RT-PCR方法检测单核细胞因子的mRNA表达。结果：1. 体外实验结果显示, 五加皮提取物对MT-2、HL-60、Raji、TMK-1和HSC-2肿瘤细胞的增殖有较强的抑制作用，而且有较好的量效关系。2. 五加皮提取物经口投入荷瘤小鼠后，实验组小鼠一般情况较对照组小鼠好，肿瘤生长缓慢，生存期延长。<WP=4>3. 经凝胶层析联合分析，分离得到一种对肿瘤细胞增殖反应有抑制作用的蛋白质成分，经SDS-PAGE电泳分析，确定五加皮中对肿瘤细胞增殖有抑制作用的成分是一种分子量约64Kda的单纯蛋白质，经蛋白酶E和NaIO4处理分析显示该成分仅与蛋白质成分有关，与糖成分无关。4. 体外活力实验证明, 五加皮蛋白仅抑制肿瘤细胞增殖，不导致肿瘤细胞死亡。在五加皮蛋白作用下，使肿瘤细胞停止在细胞周期的G0/G1期，未显示直接的细胞毒效应。蛋白印迹结果显示五加皮蛋白可诱导Rb、CdK2和Cdk4等细胞周期控制酶表达降低，致使细胞停止增殖。5. 五加皮蛋白与单核细胞共同培养后，单核细胞TNF-α和IL-12等细胞因子的产生明显增加，而且有较好的量效关系。在单核细胞与LPS的培养体系中加入不同浓度的五加皮蛋白，经培养后与单独加入LPS相比TNF-α分泌量显著增加，显示了五加皮蛋白对LPS的单核细胞刺激有促进作用。经五加皮蛋白处理单核细胞后，TNF-α和IL-12等细胞因子的mRNA表达水平也明显增加。荷瘤小鼠经口连续投入五加皮蛋白后，血清中和脾脏单核细胞培养上清中TNF-α和IL-12含量及细胞mRNA的表达也明显增高。从蛋白水平和分子水平证明五加皮蛋白对单核细胞细胞因子产生在体内和体外都有促进作用。结论：中药五加皮提取液在体外对多种肿瘤细胞的增殖有较强的抑制作用，并有较好的量效关系；在体内能显著抑制荷瘤小鼠S180肿瘤生长，延长荷瘤小鼠生存期。五加皮的抗肿瘤活性成分是一种分子量约64Kda的蛋白质。该蛋白质通过调节控制细胞周期酶类的活性使肿瘤细胞停<WP=5>止增殖，达到治疗肿瘤的作用。此外，中药五加皮提取物对单核细胞有较强的刺激作用，不但增强单核细胞对肿瘤细胞的吞噬功能，而且可以促进单核细胞因子TNF-α和IL-12等的产生和mRNA表达。