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由于ZBTB家族成员主要表现为转录调控因子，通过BTB结构域和ZNF结构域介导的蛋白与蛋白之间的互作及蛋白与特异性碱基序列的结合从而调控基因的转录活性，进而影响细胞的增殖、分化、迁移、凋亡和细胞周期等重要的生理功能。目前关于ZBTB8A功能研究的报道很少，根据NCBI数据库查阅人ZBTB8A相关信息设计相应的引物，通过RT-PCR从胃癌细胞系AGS中克隆到人ZBTB8A基因，测序证实其为目的基因，构建ZBTB8A全长及其截短的不同重组质粒，为后续实验做准备。使用ZBTB8A全长及其截短的GFP融合表达载体来探索其在亚细胞水平上的分布情况，亚细胞定位显示：GFP呈全细胞分布；GFP-ZBTB8A融合蛋白位于细胞核且呈斑点状分布；GFP-ZBTB8A-BTB融合蛋白显示核周斑点状分布，GFP-ZBTB8A-ZNF融合蛋白呈细胞核均匀分布。这些结果表明，ZBTB8A蛋白是一个转录因子存在于核内，其中这两个结构域在斑点状分布中均起着重要的作用，这可能与它们自身结构域的功能相关。为了探讨ZBTB8A可能参与调控的细胞信号通路，采用双荧光素酶检测试剂盒来检测ZBTB8A对相关信号通路的转录调控作用。双荧光素酶实验显示：ZBTB8A蛋白抑制多个细胞信号通路活性，特别对pCRE-Luc具有显著的抑制效应并表现为剂量依赖性。这说明ZBTB8A蛋白在某些功能方面可能作为一个转录抑制因子，参与多个细胞信号通路活性的调控，进而影响细胞的增殖、分化、凋亡、迁移和细胞周期等重要的生理过程。将原核表达载体pGEX-4T-1-ZBTB8A转化到BL21宿主菌，当菌体生长至对数期，加入终浓度为0.6mM IPTG诱导5小时，将诱导的菌体裂解液经SDS-PAGE电泳后，浸泡于0.25M KCl溶液，切下乳白色的目的条带并切碎，电洗脱和透析，获得GST-ZBTB8A融合蛋白，免疫印迹实验进一步证实所纯化的蛋白为目的蛋白（抗GST标签抗体），BCA法测定其浓度为1.254mg/mL，用纯化的蛋白多次免疫兔子，获得相应的免疫血清。应用免疫印迹实验对免疫血清进行特异性分析，实验表明：免疫血清中既含抗ZBTB8A蛋白的抗体又含抗GST标签的抗体；ZBTB8A蛋白中的BTB结构域和ZNF结构域均为抗原决定簇即多克隆抗体中含抗这两个结构域的抗体；多克隆抗体可用于内源性表达ZBTB8A蛋白的检测。通过琼脂糖双扩散实验测定其效价为1:32；使用ProteinG纯化免疫血清，SDS-PAGE检测其纯化效果，获得相对较纯的抗体，为进一步的研究提供一定的支持。