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目的:探讨低O2高CO2暴露对小鼠皮层及海马神经细胞凋亡及硝基酪氨酸表达的影响
方法:将SPF级雄性C57BL/6小鼠24只,体重23~27g,随机分成3组:即正常对照组(NC,n=8)、低O2高CO22周组(2HH,n=8)、低O2高CO24周组(4HH,n=8)。将后两组小鼠置于常压低O2高CO2舱内,通过N2调节使舱内O2浓度维持在9%~11%,CO2浓度为5.5%~6.5%,每天8小时,每周6天。对照组小鼠除吸入空气外,其它条件与后两组相同。动物饲养到规定时间后,用戊巴比妥钠(35mg/kg)腹腔麻醉,(1)采用右心导管法测量右心室收缩压(rightventriclesystolicpressure,RVSP),分别称取右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV+S)的重量,以RV/LV+S的重量比,作为右室肥大的指标。(2)采用原位末端标记法(Tunel法)检测皮层和海马区细胞凋亡指数(AI)。(3)采用免疫组织化学染色检测皮层和海马区细胞硝基酪氨酸表达。
结果:(1)2HH和4HH的RVSP、RV/(LV+S)值均分别高于NC(均P<0.01),随着时间的延长,4HH的RVSP较2HH增高更加明显(P<0.01)。RV/LV+S在慢性低O2高CO22周时达最高,2HH与4HH无明显差异(P>0.05)。(2)TUNEL染色发现,2HH和4HH的皮层和海马AI均明显高于NC(均P<0.01):NC皮层和海马神经细胞凋亡少见。(3)免疫组化检测显示:2HH和4HH的皮层、海马NT表达较NC明显增多(均P<0.01)。随着暴露低O2高CO2时间延长,NT的表达逐渐增多。(4)相关分析显示,皮层和海马区硝基酪氨酸表达与神经元凋亡指数呈正相关关系(P<0.01)。
结论:(1)慢性低O2高CO2可以诱发小鼠皮层和海马神经元凋亡,且随着低O2高CO2暴露时间的延长,神经细胞凋亡逐渐增多。(2)慢性低O2高CO2可使小鼠皮层和海马神经细胞表达的硝基酪氨酸增多,并随着暴露时间的延长而增加。(3)硝基酪氨酸表达增高可能与皮层和海马神经细胞损伤有关,并导致神经细胞凋亡。