四逆汤通过TLR4/NF-κB通路改善大鼠心肌肥厚的研究

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目的观察四逆汤对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌肥厚的干预作用,并从炎症反应角度探究其可能的作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为对照(CON)组、模型(ISO)组、卡托普利(CAP)组和四逆汤(SND)组,均为9只。除CON组皮下注射生理盐水外,ISO组、CAP组和SND组皮下注射ISO 5mg/(kg·d),连续1周复制心肌肥厚模型。造模后按CAP组给予0.1g/(kg·d)卡托普利,2mL/只;SND组给予3.8g/(kg·d)四逆汤,2mL/只;CON组和ISO组给予蒸馏水,2mL/只。连续灌胃给药4周。给药结束后,称体重(BW)并测量大鼠的血流动力学,称量全心重量(HW)及左心室重量(LVW)并计算全心重量指数(HWI)和左心室重量指数(LVWI)。苏木精-伊红(HE)染色观察心肌细胞肥大程度,并测量心肌细胞的跨核最短直径及横截面积。Masson三色染色观察胶原纤维增生的情况并计算胶原容积分数(CVF);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的浓度;Western blot测定Toll样受体4(TLR4)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)和细胞核内的核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)蛋白的表达;QRT-PCR测定TLR4mRNA和肥大基因心房钠尿肽(ANP)和脑钠尿肽(BNP)mRNA表达。结果与CON组相比,ISO组大鼠心脏收缩能力降低,心功能受损;HW、LVW、HWI、LVWI均增加;心肌细胞肥大并且左心室心肌细胞的跨核直径、横截面积均显著增加;胶原纤维增生且CVF值增加;血清中TNF-α、IL-6的含量和心肌组织中TLR4、NF-κBp65、ANP、BNP表达升高,IκBα蛋白表达降低。与ISO组相比,SND组和CAP组心功能受损程度减轻;HW、LVW、HWI、LVWI降低;心肌细胞肥大程度减轻且跨核直径和横截面积均显著降低;胶原纤维增生减少,CVF值减少;血清中TNF-α、IL-6含量和心肌组织中TLR4、NF-κBp65、ANP、BNP表达降低,IκBα蛋白表达升高。结论四逆汤可以有效改善由异丙肾上腺素诱导所致的病理性心肌肥厚,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路,下调炎症因子,减少胶原纤维的沉积有关。
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