论文部分内容阅读
目的：观察冰片对大鼠血-视神经屏障通透性的影响，研究冰片对血-视神经屏障的作用机制。
方法：①合成冰片(0.5g/kg)溶媒灌胃，荧光分光光度法检测视神经内不同时间点示踪剂伊文思兰的浓度；②电镜观察冰片作用后各时间点血-视神经屏障内超微结构变化；③免疫荧光法测定视神经内紧密连接膜蛋白的表达；④RT-PCR和Western blot法定量分析冰片灌胃后紧密连接膜蛋白的变化。
结果：①大鼠冰片灌胃30min时视神经内伊文思兰含量升高(20.53±1.01μg/g，p<0.01)，1h时伊文思兰含量达高峰(29.11±1.74μg/g，P<0.01)，8h时恢复(4.69±0.34μg/g，P>0.05)；②冰片灌胃30min时吞饮小泡数量增加(58.5±5.47，P<0.01)，紧密连接出现缝隙；1h吞饮小泡继续增多(81.33±4.68，P<0.01)，紧密连接缝隙变宽、变多：8h恢复至正常水平（29.33±2.58，P>0.05），紧密连接恢复连续完整的结构；③Claudin-5在冰片灌胃30rain后开始由细胞膜向细胞质转移并在lh时达到高峰，Occludin亦于此时间段内少量向细胞质内移动；4h时胞质内两种荧光蛋白颗粒开始减退：8h后恢复成if正常的荧光形态。④冰片灌胃与空白对照灌胃RT-PCR结果均显示Claudin-5和Occludin的mRNA表达在灌胃前及灌胃后8h内变化无显著性差异（F值分别为0.925、0.186，P均>0.05）；Western结果办显示两组在灌胃前及灌胃后的8h内，Claudin-5及Occludin的蛋白表达变化无显著性差异（F值分别为0.248、0.122，P均>0.05）。
结论：该浓度的冰片能够可逆性开放血-视神经屏障，这种作用可能与紧密连接开放和吞饮小泡增加有关；冰片干预下血-视神经屏障的Claudin-5与Occludin发生重新分布并呈可逆性，Claudin-5可能在冰片开放屏障过程中发挥重要作用。