Mir-27a通过调控LAMP2诱导LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转换影响自噬的分子机制

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目的:研究miR-27a在离体条件下对细胞自噬调节的分子机制  方法:(1)透射电镜观察神经元转染miR-27a或AMO-27a后自噬小体的变化;(2) Western blot及免疫荧光技术检测miR-27a对与细胞自噬相关的蛋白Beclin1,LC3,P62以及LAMP2的影响;(3) Western blot及免疫荧光技术检测miR-27a对自噬清除功能的影响;(4) Luciferase检测miR-27a对LAMP2的调控作用。  结果:(1) miR-27a使原代培养的神经元中的自噬小体增多,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值增大;(2) miR-27a促进自噬小体增多,LC3蛋白表达增加与抑制自噬清除有关;(3) miR-27a靶向作用于Lamp2的3UTR,使LAMP2的表达下降。  结论: miR-27a通过调控LAMP2蛋白的表达,诱导LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转换,进而促进自噬的形成。
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