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目的:本研究以香烟烟雾暴露的HBE(人肺泡上皮)细胞为模型,验证穿心莲内酯是否通过调控miR-218的表达来缓解香烟引起的上皮细胞炎症反应;临床上通过观察穿心莲内酯治疗急性加重期慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)的炎症抑制作用,进而揭示穿心莲内酯在预防吸烟引起的肺部炎症反应中有临床意义。方法:第一部分穿心莲内酯对HBE细胞的抗炎作用研究1.1穿心莲内酯对CSE-HBE细胞促炎症细胞因子表达的影响采用CSE预处理,构建炎症反应的HBE细胞模型,将细胞分为四组,分别是CSE组、CSE+穿心莲内酯组、CSE+PBS组及空白对照组。各组细胞用蛋白分离盒分离核蛋白及胞浆蛋白,通过ELISA测定TNF-α、IL-6和IL-8的表达水平。1.2 CSE-HBE细胞中穿心莲内酯对miR-218表达的影响将HBE细胞分四组,为CSE组、CSE+穿心莲内酯组、CSE+PBS组及空白对照组,使用RT-PCR测定上述细胞内的miR-218含量。1.3 CSE-HBE细胞中miR-218 inhibitor对TNF-α、IL-6和IL-8表达的影响将HBE细胞仍分四组,为CSE组、CSE+穿心莲内酯组、CSE+穿心莲内酯+anti-miR-218组及空白对照组。各组细胞用蛋白分离盒分离核蛋白和胞浆蛋白,通过ELISA测定各组细胞内TNF-α、IL-6和IL-8表达。第二部分穿心莲内酯治疗AECOPD患者的临床观察随机将100例中、重度的AECOPD患者分为对照组及治疗组,各50例。对照组给予常规抗感染+对症治疗,治疗组另加用穿心莲内酯;治疗5天比较两组患者血气PO2、PCO2,FEV1%pred以及ELISA法检测诱导痰液和血清TNF-α、IL-6及IL-8含量。结果:第一部分穿心莲内酯对COPD的抗炎作用研究1.1穿心莲内酯对CSE-HBE细胞促炎症细胞因子表达的影响各CSE组中,TNF-α、IL-6和IL-8表达均比空白组明显上升;在CSE各组间进行炎症因子表达差异比较:穿心莲内酯组与未用药组其表达明显降低。1.2 CSE-HBE细胞中穿心莲内酯对miR-218表达的影响各CSE组内,miR-218表达量与空白对照组比为明显降低,miR-218的表达量在预穿心莲内酯组细胞与其他CSE组相比则有显著增加。1.3 CSE-HBE细胞中miR-218 inhibitor对TNF-α、IL-6和IL-8表达的影响各CSE组中,三种炎症因子水平较空白组为明显上升;穿心莲内酯组与未行预处理的CSE组比则明显降低;穿心莲内酯降低炎症因子的能力则明显降低,在miR-218沉默后。第二部分穿心莲内酯治疗AECOPD患者的临床观察与对照组相比,穿心莲内酯治疗5天的治疗组患者PO2、FEV1%pred数值显著升高,PCO2显著降低(P<0.05);血液和痰液中TNF-α、IL-6及IL-8水平显著降低(P<0.05)。结论:miR-218的表达可被穿心莲内酯处理后表达上调,阻碍CSE-HBE细胞中的炎症因子(TNF-α、IL-6和IL-8)表达,达到减轻CSE-HBE细胞的炎症反应作用。临床方面,穿心莲内酯通过降低炎症因子水平从而减轻急性加重期慢性阻塞性肺疾病患者气道炎症。