缺血性心脑血管病是一种在世界范围内高发的疾病,近年来其治疗研究的进展突飞猛进,其中应用干细胞治疗该病的报道越来越多。基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor, SDF-1)是目前已知的与干细胞动员有关的最强趋化因子,它可以通过与其特异性受体CXCR4结合激活一系列信号通路,从而在组织缺血后起到炎症调节、促进干细胞动员、诱导血管再生的作用。SDF-1属于CXC类趋化因子,人SDF-1(hSDF-1)编码序列位于10q11.1染色体上,由于不同的剪切方式可以编码两种蛋白,SDF-1α和SDF-1β,在体内以SDF-1α为主。本文根据NCBI中发表的hSDF-1α cDNA序列设计引物,首先通过PCR的方法从重组质粒pCMV-SPORT6-SDFlα中扩增出hSDF-1α基因,将其克隆入pET15b,成功构建了非融合表达载体pET15b-SDF-1α。然后将重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),菌株经IPTG诱导表达后超声破碎,SDS-PAGE分析,结果表明目标蛋白主要以包涵体形式存在于菌体细胞质中。对包涵体进行洗涤、变性及稀释复性处理后得到上清用强阳离子交换柱SP Sepharose F.F.进行初步分离纯化,得到重组蛋白hSDF-1α。最后用Transwell细胞迁移实验测定目标蛋白活性,结果表明含重组hSDF-1α蛋白的实验组趋化的THP-1细胞数明显多于对照组。结论：成功构建了非融合载体pET15b-SDF-1α,并在大肠杆菌中高效表达,实现了对目标蛋白的初步分离纯化,重组hSDF-lα蛋白对THP-1细胞有趋化活性。