多环芳烃暴露对焦炉工外周血细胞代谢酶基因甲基化及基因表达水平的影响

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目的:分析多环芳烃(PAHs)暴露与焦炉工人外周血细胞中芳烃羟化酶(CYP1A1)与谷胱甘肽硫转移酶(GSTP)基因DNA启动子区CpG岛甲基化水平及mRNA表达水平改变之间的关系,以期寻找PAHs暴露对人群健康危害的早期效应生物标志物,为保护人群健康提供依据。方法:选取118名职业接触PAHs的焦化厂工人(接触组)和63名供水厂工人(对照组)为研究对象,将接触组工人按照工种分为炉顶、炉侧、炉底三个接触水平,以面对面问卷调查其年龄、性别、工龄、工种、吸烟饮酒情况、受教育情况、生活习惯以及个人疾病史、家族史和用药史等情况,整理核对数据后录入Epidata数据库。收集工人班后尿,用高效液相色谱法检测尿中1-羟基芘(1-OH-Py)的含量;采集晨起空腹肘静脉血,EDTA抗凝,用荧光定量聚合酶链式反应(QT-PCR)检测研究对象外周血细胞中CYP1A1、GSTP基因启动子区CpG岛的甲基化水平以及mRNA表达水平,统计分析PAHs暴露与CYP1A1、GSTP基因甲基化和表达水平之间的关系。结果:第一部分:尿1-OH-Py水平随着接触水平的升高而升高,且与对照组相比,各接触水平组的1-OH-Py水平显著升高,差别有统计学意义(P<0.05);炉侧组1-OH-Py水平较炉底组显著升高,差别有统计学意义(P<0.05);炉顶组1-OH-Py水平较对照组与炉底组显著升高,但与炉侧组差别没有统计学意义。接触水平与尿中1-OH-Py的水平呈正相关(r=0.364,P<0.001)。第二部分:炉底、炉侧与炉顶作业工人CYP1A1基因DNA启动子区CpG岛甲基化水平低于对照组,炉底、炉侧作业工人的CYP1A1甲基化水平显著低于对照组(P<0.05)。CYP1A1 mRNA的水平接触组低于对照组,各接触组与对照组差别均统计学意义(P<0.05)。随着尿中1-OH-Py水平的增高,CYP1A1甲基化水平有先升高后降低的趋势,而mRNA水平降低。CYP1A1 mRNA水平与1-OH-Py之间呈负相关(r=-0.269,P<0.001)。第三部分:接触组GSTP基因DNA启动子区CpG岛甲基化水平低于对照组,各组与对照组之间差别有统计学意义(P<0.05)。基因表达水平各接触组低于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。CYP1A1甲基化与GSTP甲基化水平之间呈正相关(r=0.831,P<0.001);与GSTP mRNA之间呈负相关(r=-0.244,P=0.002);GSTP甲基化水平与mRNA水平之间呈负相关(r=-0.18,P=0.027);CYP1A1、GSTP之间的mRNA呈正相关(r=0.241,P=0.001)。结论:(1)焦炉工人尿中1-OH-Py水平随着B(a)P暴露水平升高而升高,1-OH-Py的水平可很好的作为内暴露生物标志物评价焦炉工的B(a)P接触水平。(2)随着尿中1-OH-Py的升高,焦炉工人外周血中参与B(a)P代谢活化的酶CYP1A1基因表达水平明显下调,甲基化水平降低趋势,但是不明显。CYP1A1表达水平有可能作为职业人群接触有害物质的生物标志物,为保护高危人群提供依据。(3)随着尿中1-OH-Py的升高,焦炉工人外周血中参与B(a)P的代谢解毒酶GSTP表达水平下调,甲基化水平明显降低,基因表达水平与该基因DNA启动子区CpG岛的甲基化水平呈负相关,GSTP甲基化水平有可能作为职业人群接触有害物质的生物标志物,为保护高危人群提供依据。
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