论文部分内容阅读
目的:研究大蒜素对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除小鼠(apolipoprotein E gene knockout,apoE-/-)动脉粥样硬化斑块稳定性的影响,并从抗炎及抗凋亡方面探讨大蒜素干预动脉粥样硬化进展的作用机制。方法:选取24只健康8周龄雄性apoE-/-小鼠,体质量20-22g,适应性饲养1周后给予高脂饲料构建动脉粥样硬化模型,8周后按照随机数表发随机分为3组:低剂量大蒜素组、高剂量大蒜素组和模型组,每组8只,模型组每只给予0.5ml0.9%生理盐水灌胃,低剂量组给予0.25ml0.9%生理盐水+0.25ml大蒜素溶液灌胃,高剂量组给予0.5ml大蒜素溶液灌胃。大蒜素干预8周后处死小鼠,眼球取血,使用酶联免疫吸附测定法检测apoE-/-小鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和C反应蛋白含量,取主动脉根部作病理染色,苏木素-伊红染色观察主动脉病理组织学变化,脱氧核糖核苷酸转移酶介导d UTP缺口末端标记法染色法检测斑块内的细胞凋亡,天狼星红染色评估斑块胶原含量,免疫组化染色检测斑块内巨噬细胞含量、平滑肌细胞含量及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白因子的表达。将实验所得数据进行正态性和方差齐性检验分析,符合条件者采用单因素方差分析结合方差分析,使用卡方检验百分数比较,不符合条件者采用秩和检验,结果以（x|-）±s表示,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:高、低剂量大蒜素均未对小鼠体质量和血脂产生明显影响（P>0.05）;低剂量大蒜素显著降低斑块内C反应蛋白含量（P<0.01）,高剂量大蒜素也有降低C反应蛋白的作用（P<0.05）;苏木素-伊红染色结果显示,模型组斑块内发现大量死亡泡沫细胞和结晶的胆固醇,斑块面积大,大蒜处理后斑块面积减小,斑块结构趋于稳定,小剂量大蒜素组具有统计学意义（P<0.01）;脱氧核糖核苷酸转移酶介导d UTP缺口末端标记法染色发现,低剂量大蒜素组斑块内凋亡面积显著减少（P<0.05）,高剂量大蒜素组凋亡面积虽有减小趋势但无统计学意义（P>0.05）。天狼星红染色显示,与模型组相比,大蒜素可增加胶原含量且结果具有统计学意义（P<0.05）;免疫组化结果显示,低剂量大蒜素可减少斑块内巨噬细胞聚集,降低Bax、Caspase-3表达,增加Bcl-2表达（P<0.01）,与模型组及高剂量大蒜素组相比具有统计学差异（P<0.05）,但平滑肌细胞含量各组之间未见明显差异（P>0.05）。结论:大蒜素能有效稳定apoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块,延缓动脉粥样硬化斑块进程,其机制可能与降低炎症反应和调节凋亡有关。