丹参酮ⅡA联合DAPT对UUO模型大鼠肾组织Wnt1和β-catenin蛋白表达的影响

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目的:观察丹参酮ⅡA联合DAPT对UUO大鼠肾组织中Wnt1和β-catenin蛋白表达的影响,进一步研究丹参酮ⅡA联合DAPT的疗效,为其临床应用提供实验依据。方法:40只雄性SD大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、丹参酮ⅡA组、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组、丹参酮ⅡA联合DAPT组(简称丹参酮ⅡA+DAPT组)。采用单侧输尿管梗阻法(UUO)建立动物模型,造模后给予相应药物干预14天。通过masson染色观察肾组织胶原纤维沉积。免疫组织化学方法检测Wnt1、MMP7蛋白的表达和分布。蛋白免疫印迹法检测Wnt1、β-catenin和Numb的蛋白表达。结果:1.Masson染色结果:假手术组肾间质见极少量淡蓝色胶原沉积,模型组大鼠肾间质见大量蓝色胶原广泛沉积,模型组肾组织Masson评分显著高于假手术组(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肾组织蓝色胶原沉积显著减轻,Masson评分均明显降低(P<0.05);各给药组间丹参酮ⅡA+DAPT组大鼠肾组织Masson评分较丹参酮ⅡA组、DAPT组显著降低(P<0.05)。2.免疫组化检测结果:与假手术组比较,模型组大鼠肾组织见Wnt1和MMP7蛋白在肾小管及间质中广泛表达,模型组大鼠肾组织Wnt1、MMP7蛋白平均光密度值显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肾小管及间质中的Wnt1、MMP7蛋白表达及平均光密度值均较模型组显著降低(P<0.05);各给药组间比较,丹参酮ⅡA+DAPT组大鼠肾组织Wnt1、MMP7平均光密度值较丹参酮ⅡA组、DAPT组显著降低(P<0.05)。3.蛋白免疫印迹检测结果:与假手术组比较,模型组大鼠肾组织Wnt1、β-catenin、Numb蛋白相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组肾组织Wnt1、β-catenin、Numb蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);各给药组间丹参酮IIA+DAPT组肾组织Wnt1、β-catenin和Numb蛋白相对表达量较丹参酮IIA与DAPT组显著降低(P<0.05)。结论:丹参酮IIA、DAPT及其联合用药对UUO大鼠肾纤维化具有保护作用,且联合组效果优于单一用药组,其延缓肾纤维化进程机制可能与其能降低UUO肾组织Wnt1、β-catenin、MMP7、Numb蛋白的表达有关。
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