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研究目的:通过检测胃癌的癌组织与癌旁正常组织白介素26(Interleukin-26,IL-26)表达及基因表达水平,同时检测外周血中胃癌患者与正常人群IL-26的表达水平,探讨IL-26在胃癌中的表达情况。与收集到的患者生物学特征资料关系初步判断IL-26是否对胃癌诊断价值,结合同期的胃癌常用血清肿瘤标记物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖链抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)、糖链抗原24-2(carbohydrate antigen 24-2,CA24-2)、糖链抗原72-4(carcinoembryonic antigen 72-4,CA72-4)的表达水平联合评估血清IL-26在胃癌诊断中的应用价值。研究方法:1.收集50例在本院就诊的胃癌患者手术中取得的病理组织为研究对象,采用免疫组化实验方法由ImagePro Plus6.0软件分析,利用平均OD值半定量评估IL-26在癌组织与癌旁正常组织的表达,由F检验比较在胃癌与癌旁中IL-26表达水平差异。通过RT-PCR实验方法分析胃癌组织与癌旁正常组织中的IL-26的mRNA表达差异,由非参数曼-惠特尼U检验统计分析结果。2.收集176例胃癌患者和同期176例体检正常个体外周血为研究对象,通过ELISA酶联免疫吸附试验检测血清IL-26的表达水平,由非参数曼-惠特尼U检验比较在胃癌组与正常组IL-26表达差异。通过在本院收集的实验对象的临床病例资料由非参数曼-惠特尼U检验统计方法评估血清IL-26与胃癌患者生物学特征之间的联系。3、以上述的176例胃癌患者和同期176例体检正常个体外周血为研究对象,通过ELISA酶联免疫吸附试验检测同期的常用在胃癌诊断血清肿瘤标记物CEA、CA19-9、CA24-2、CA724的表达水平。4、由受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)诊断实验分析IL-26的诊断价值,通过Youden指数得出IL-26的cut off值及诊断敏感度、特异度等临床应用诊断指标,与同期的在临床上常用的胃癌诊断血清肿瘤标记物CEA、ca19-9、ca24-2、ca72-4的诊断指标作比较分析,最后根据多元logistic回归方程建立诊断数学模型评估il-26在联合cea、ca19-9、ca24-2、ca72-4检测时的胃癌诊断应用价值。研究结果:1、由免疫组化结果分析在胃癌组织与癌旁正常组织中,胃癌组织呈现100%(50/50)il-26的阳性表达,而癌旁正常组织出现70%(35/50)il-26的阳性表达。由image-proplus6.0软件统计细胞染色强度的平均光密度(od)值,选定面积一定时,od值越高il-26的表达越高,统计出胃癌组织与癌旁正常组织的平均od值,胃癌组织中平均od值为0.25±0.11,而癌旁正常组织平均od值为0.09±0.05。f检验比较二组间差异,胃癌高于癌旁且差异有统计学意义。(p<0.001)。胃癌患者的胃癌粘膜组织中的il-26的mrna的表达量由非参数曼-惠特尼u检验统计方法得出其显著高于癌旁正常胃粘膜组织中的il-26的mrna表达(p<0.05)。2、由elisa试验得出结果胃癌组血清il-26中位值为279.89pg/ml[(241.21~301.38)pg/ml],正常组il-26中位值为216.10pg/ml[(172.13~264.09)pg/ml]。与正常组比较,胃癌组il-26明显增加(p<0.05)。3、分析il-26与胃癌患者的生物学特征的临床病理资料结果,年龄在60岁以上或等于60岁与年龄小于60岁的患者中血清il-26的表达水平上无明显差异(p>0.05),男性胃癌患者与女性胃癌患者在血清il-26的表达水平上无明显差异(p>0.05),在胃癌所处的部位贲门区与非贲门区胃癌在血清il-26的表达水平上无明显差异(p>0.05),癌肿大于5cm和小于等于5cm的胃癌患者在血清il-26的表达水平上有差异(p<0.05),且大于5cm比小于等于5cm的胃癌的il-26的表达水平高,劳伦分型中肠型胃癌患者与弥漫性胃癌患者的血清il-26表达水平上不存在明显差异(p>0.05),在幽门螺杆菌阳性与幽门螺杆菌阴性的患者中il-26表达水平上不存在明显差异(p>0.05),淋巴结转移阳性与淋巴结转移阴性者il-26表达水平无明显差异(p>0.05),而在处于临床分期早期与临床分期进展期受试者关于il-26表达水平存在差异(p<0.05)且进展期胃癌患者中血清il-26表达水平高于临床分期早期胃癌的表达水平。总结,胃癌患者血清il-26的水平与肿瘤的大小、临床分期相关(p均<0.05),与年龄、性别、肿瘤位置、劳伦分型、有无淋巴结转移、幽门螺杆菌感染(p均>0.05)等无明显相关性。4、血清IL-26在胃癌组与正常组ROC曲线分析结果如下:IL-26在ROC曲线下面积(AUC)是0.93,根据统计学原则AUC>0.9诊断准确性高。由Youden指数最大值对应的为252.76 pg/ml作为cut off值,得出诊断敏感度79.2%,诊断特异度87.4%(P=0.007)。而同样胃癌患者血清CEA、CA19-9、CA24-2、CA72-4ROC曲线分析结果是:在ROC曲线下AUC分别为0.85、0.68、0.82、0.71,诊断敏感度56.3%、38.6%、41.3%、62.4%,诊断特异度96.1%、93.9%、95.9%、85.2%。将IL-26与胃癌常用的肿瘤诊断标记物CEA、CA19-9、CA24-2、CA72-4联合检测IL-26+CEA+CA19-9+CA24-2+CA72-4的诊断敏感度是89.2%,诊断特异性是97.6%,提高了整体的敏感度和特异度,比任何单项检查均有提升。研究结论:1、通过免于租花及RT-PCR法检测胃癌切除标本证实了在中胃癌组织与癌旁组织相比IL-26及其基因呈高表达,这可能与胃癌组织中微环境改变,在趋化因子的作用下,Th17细胞募集引起的主要由Th17分泌的白介素IL-26在局部组织中升高。2、IL-26在胃癌患者血清中相对于同期正常组人群呈现过表达差异有统计学意义,结合生物学特征发现IL-26的表达水平与肿瘤的大小、临床分期有明显相关性差异有统计学意义,临床分期晚期胃癌患者中IL-26明显高于临床分期早期,这为我们探索血清IL-26能否作为血清标记物提供了依据。3、通过ROC法评估血清中IL-26在胃癌中的诊断价值,结果显示灵敏度高于同期在临床常用的胃癌血清学肿瘤标记物癌胚抗原CEA0、CA19-9、CA24-2、CA72-4,而诊断的特异度也保持在较良好的水平,联合胃癌肿瘤标志物CEA、糖链抗原CA19-9、CA24-2、CA72-4检测可提高诊断效能。联合检测均比单独检测有提高,但得到临床广泛应用仍需加入炎症等因素扩大样本量及多中心多区域综合分析证实其可靠性以及实用性。