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随着转基因作物种植面积的扩大和商业化程度的加深,转基因作物的安全性也受到了人们的关注。2007年,全球转基因作物种植面积增长率达12%,达到1.143亿h㎡(2.824亿英亩),种植转基因作物的国家增加到了23个。但是存在于转基因植物中的具有抗生素或除草剂抗性的标记基因是否会对环境及人类健康有不良影响和损害引起了广泛关注,因此转基因植物中标记基因的剔除成为亟待解决的问题。
本研究利用Cre/loxP系统和受化学诱导的GR系统,将GR LBD结构域序列与Cre重组酶基因结合形成融合基因,之后与抗潮霉素标记基因一起插入到两个同向loxP位点内,构建形成基于Cre/loxP系统诱导删除抗生素基因的表达载体。为了稳定整个载体的结构、防止Cre重组酶基因在原核生物中表达,将拟南芥隐花色素1(Cry1)的内含子(Intron-346)插入到重组酶基因中。同时为了降低重组酶基因表达产物对植物的毒害作用,载体构建过程中选用表达量较低的Pnos来调控重组酶基因。本研究已完成了基于Cre/loxP系统受DEX诱导的抗生素删除载体的构建,从而为进一步获得标记基因删除的转基因植物提供了可能性,目前载体的功能正在鉴定中。