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目的：探究晚期糖基化终末产物（Advanced Glycation End Products,AGEs）对人主动脉血管平滑肌细胞(Human Aorta Vascular Smooth Muscle Cells,HASMCs)增殖和迁移的影响，进而探究ERK1/2、P38MAPK、JNK及AKT等相关信号通路是否参与HASMCs增殖和迁移。进一步探究AGEs是否与其受体RAGE以配体-受体相结合方式启动其下游信号通路参与HASMCs的增殖与迁移。为糖尿病血管动脉粥样硬化，血管腔内成形术（Percutaneous Transluminal Angioplasty,PTA）术后再狭窄等狭窄、闭塞性病变的防治提供新的策略。 方法：CCK-8法及EdU法检测HASMCs在不同浓度AGEs作用下增殖情况，流式细胞仪检测上述对应浓度条件下的AGEs对HASMCs周期转换情况；细胞划痕实验及Transwell实验测定HASMCs在上述对应浓度条件的AGEs刺激下其迁移情况，罗丹明-鬼笔环肽荧光染色后，通过激光共聚焦荧光显微镜观察HASMCs纤维肌动蛋白(F-actin)的表达情况；蛋白印迹技术(western blot)测定平滑肌细胞增殖与迁移相关蛋白的表达情况；PD98059（ERK1/2 inhibitor），SB203580(P38 inhibitor),SP600125(JNK inhibitor),LY294002(AKT inhibitor)分别预处理HASMCs，1小时之后，再加入一定浓度的AGEs，继续培养细胞24～48h,通过上述实验方法检测HASMCs增殖和迁移能力以及与增殖和迁移相关的蛋白质表达情况；经过以上实验的初步探索，我们发现抑制AKT信号通路之后，HASMCs的增殖和迁移活性均被明显抑制，表明AKT通路在AGEs诱导的HASMCs增殖和迁移过程中同时发挥重要的促进作用。故实验进一步选用AKT-siRNA转染HASMCs构建起AKT被干扰的细胞模型，同时选用RAGE-RANi慢病毒转入细胞构建起RAGE基因沉默的HASMCs模型，以探究AGEs/RAGE轴与AKT信号通路之间的关系。慢病毒载体上标记有绿色荧光蛋白基因（Green Fluorescein Protein,GFP)，当细胞被成功转染病毒后，可以稳定表达GFP,通过荧光显微镜可以观察HASMCs的转染效率，western blot检测AKT蛋白和RAGE蛋白的以验证转染是否成功。转染成功后，经AGEs干预、诱导，再通过western blot测定RAGE、AKT以及增殖和迁移相关蛋白的表达情况。 结果： 1、在一定浓度范围内，AGEs能促进HASMCs增殖和迁移。当AGEs浓度在0～10mg/l范围内时，HASMCs增殖活性逐渐增强，在10mg/l时细胞增殖数量达最高峰，超出范围后其增殖活性逐渐减弱，且浓度超过40mg/l后，细胞开始凋亡；当AGEs浓度在0～20mg/l范围内时，HASMCs迁移活性逐渐增强，在20mg/l时细胞迁移数量达最高峰，超出范围后其迁移能力逐渐减弱。 2、HASMCs经PD98059(20μmol／l)预处理后，其增殖活性被显著抑制（P<0.05,n=3）；同时观察到JNK的特异性抑制剂SP600125(40μmol／l)能显著抑制AGEs诱导的平滑肌细胞迁移（P<0.05,n=3）；而HASMCs经SB203580预处理后其增殖与迁移均无明显抑制效应（P>0.05,n=3）；但同时我们也观察到，HASMCs经LY294002(40μmol／l)预处理后，其增殖和迁移活性均被明显抑制P<0.05,n=3）； 3、HASMCs转染AKT-siRNA后，经western blot检测，与对照组相比较，转染AKT-siRNA组细胞内AKT蛋白表达明显下调P<0.01,n=3）。 4、HASMCs转染RAGE-RANi慢病毒5天后，荧光显微镜观察到细胞稳定表达绿色荧光，且经western blot检测，与对照组相比较，转染RAGE-RANi组细胞内RAGE蛋白表达明显下调（P<0.01,n=3）。 5、HASMCs的AKT基因被干扰后，其增殖、迁移相关蛋白表达明显下调（P<0.05,n=3），而当其RAGE基因被沉默后，AKT蛋白的表达明显下调，同时，增殖、迁移相关蛋白也明显下调（P<0.05,n=3）。 结论： 1、AGEs能促进HASMCs增殖和迁移，且在一定范围内表现为浓度依赖性。 2、ERK1/2和JNK分别参与AGEs诱导的HASMCs增殖和迁移，AKT同时参与AGEs诱导的HASMCs增殖和迁移。 3、AGEs/RAGE轴可能通过调控AKT通路进而促进HASMCs增殖和迁移。