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目的： 课题组前期研究发现宫颈癌细胞可自分泌血管生成素(Angiopoietin，ANG)ANGI和ANG2促进自身的迁移侵袭，但机制尚不清楚。本课题旨在明确ANG1和ANG2是否通过宫颈癌细胞表面的TIE(Tyrosine kinases with Immunoglobulinand Epidermal growth factor homology domains)受体和整合素C5pl促进肿瘤细胞的迁移侵袭。 方法： 1．免疫组织化学染色检测宫颈癌组织肿瘤细胞中ANG1、ANG2、TIE1、TIE2、整合素α5及整合素β1的表达情况。 2．SPSS软件分析宫颈癌细胞中ANGI、ANG2、TIEI、TIE2、整合素α5、整合素βl的表达水平与年龄、FIGO分期、肿瘤直径、病理类型、分化程度、深部间质浸润(Deep Stromal Invasion，DSI)、淋巴脉管浸润(LymphovascularSpace Invasion，LVSI)、盆腔淋巴结转移(Lymph Node Metastasis，LNM)等临床病理特征的相关性。 3．Logistic回归模型分析宫颈癌淋巴结转移的独立危险／保护因素。 4．Kaplan-Meier生存分析预测宫颈癌细胞中TIE2表达水平与预后的相关性。 5．Western blot和qRT-PCR分别检测宫颈癌细胞SiHa、HeLa、C33A中TIE2和整合素α5/β1在蛋白水平和mRNA水平的表达情况。 6．在SiHa、HeLa、C33A细胞中转染质粒上调TIE2或整合素α5的表达水平，转染小干扰RNA(siRNA)下调整合素α5/βl的表达水平。 7．Transwell迁移／侵袭实验检测ANG1、ANG2对宫颈癌细胞迁移／侵袭能力的影响。 结果： 1．TIEI、TIE2高表达与宫颈癌进展、转移、不良预后相关： (1)肿瘤直径大(＞4cm)的宫颈癌细胞中TIEI的表达水平高于瘤径小者(＜4cm，p=0.032)。 (2)TIE2在肿瘤直径大(p=0.029)、发生DSI(p=0.028)及LNM(p=0.050)的宫颈癌细胞中表达水平增高。 (3)宫颈癌细胞TIE2高表达患者的3年无进展生存率(p＜0.001)和3年总生存率(p=0.001)均显著低于TIE2低表达者。 2．ANG1高表达与LNM负相关： (l)发生LNM患者的宫颈癌细胞中ANGI表达水平低于无LNM者(p=0.008)。 (2)Logistic回归分析发现，宫颈癌细胞ANGI高表达是LNM的独立保护因素(p=0.014)。 3．在TIE2低表达宫颈癌中整合素CsPi表达与肿瘤进展相关，而在TIE2高表达宫颈癌中整合素α5β1高表达与肿瘤进展及浸润负相关： (l)在整个研究人群中，整合素αs和整合素β1在宫颈腺癌细胞中表达水平较鳞癌有降低趋势(pα5=0.092，pβ1=0.026)，与年龄、FIGO分期、肿瘤直径、分化程度、DSI、LVSI、LNM均无明显相关性。 (2)在TIE2低表达肿瘤中，整合素α5和整合素β1表达在晚期肿瘤（Ⅰb2-Ⅱbvs.Ial-lbl）中较高(pα5=0.053，pβ1=0.002)，与肿瘤直径、分化程度、DSI、LVSI、LNM均无明显相关性。 (3)在TIE2高表达肿瘤中，整合素α5表达在晚期肿瘤(Ⅰb2-Ⅱb vs.Ⅰal-Ⅰbl，p=0.045)和LVSI阳性肿瘤（vs.LVSI阴性肿瘤，p=0.034）中较低，与年龄、肿瘤直径、分化程度、DSI、LNM均无显著相关；整合素βl表达水平与以上临床病理特征均无明显相关性。 (4)在TIE2高表达且整合素α5或整合素β1低表达的宫颈癌患者中，DSI发生率有增高趋势(pα5=0.085，pβ1=0.056)。 4．ANG1、ANG2的作用依赖于TIE2和整合素α5β1的表达： (l)TIE2在宫颈癌细胞系SiHa、HeLa、C33A中均低表达；整合素α5在SiHa细胞中低表达，HeLa和C33A细胞中高表达；整合素βl在SiHa、HeLa、C33A细胞中均高表达。 (2)外源性ANGI、ANG2对低表达TIE2和整合素α5的SiHa细胞迁移侵袭能力无明显影响，对低表达TIE2高表达整合素α5的HeLa细胞的迁移能力亦无明显影响，但可促进HeLa细胞侵袭。 (3)在HeLa细胞中下调整合素α5βl后，ANGI、ANG2的促侵袭作用消失，对迁移能力无明显影响；在SiHa细胞中上调整合素α5后，ANGI、ANG2对迁移能力无明显影响，ANG2可促进SiHa细胞侵袭，但ANG1对其侵袭能力无明显影响。 (4)上调SiHa细胞TIE2表达后，ANGI、ANG2对SiHa细胞具有明显的促迁移和促侵袭作用；上调HeLa细胞TIE2表达后，ANG1对HeLa细胞的促侵袭作用转变为抑制侵袭作用，ANG2的促侵袭作用也消失；而ANGI、ANG2对HeLa细胞的迁移能力仍无明显影响。 (5)在SiHa细胞中同时上调TIE2和整合素α5后，ANGI、ANG2对SiHa细胞迁移侵袭能力无明显影响；在HeLa细胞中同时上调TIE2并下调整合素α5后，ANG1、ANG2对HeLa细胞具有促迁移和促侵袭作用。 结论： ANG1和ANG2的促宫颈癌细胞迁移侵袭作用可由TIE2或整合素α5βl介导；但在TIE2和整合素α5均高表达的癌细胞中，ANG1似乎发挥抑制肿瘤侵袭的作用，该机制还有待进一步证实。