改良沉淀聚合法制备雌二醇分子印迹微球及其应用研究

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分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers,MIPs)是人工合成的可特异性吸附靶分子(模板分子)的高分子化合物。MIPs可特异性识别和结合靶分子,物理性质稳定,耐有机溶剂、酸碱和热,因而在分离检测痕量有机污染物方面有具有广阔的应用前景。分子印迹聚合物的制备方法各种各样,其中沉淀聚合以其制备简易、粒径可控、产率较高、印迹效果极好的特点成为当前最常见的聚合方法。但是常规沉淀聚合法中需要使用大量的致孔剂(约为总体积的95%),容易造成环境污染和成本的提高。为克服常规沉淀聚合方法的缺点,本实验室首先建立了改良的沉淀聚合法(modified precipitation polymerization, MPP)。本论文以环境雌激素中的雌二醇为模板分子,使用改良沉淀聚合方法制备低分散度的MIPs微球,并系统探讨了聚合条件对MIPs微球形态和吸附性能的影响,优化制备条件。然后将吸附性能最佳的MIP作为固相萃取的固定相,分离和富集生物和环境样本中的雌二醇,结合HPLC方法,测定鸡、桔汁、鱼、猪、自来水中痕量的雌二醇。本论文所做工作包括以下两个方面:一、以雌二醇为模板分子,采用沉淀聚合法合成分子印迹微球,并通过选择性实验和前沿色谱,研究印迹聚合物选择性和结合特征的影响。二、以吸附性能最优的雌二醇分子印迹微球做为固相萃取的固定相,分离和富集鸡、桔汁、鱼、猪、自来水中痕量的雌二醇。首先优化平衡、上样、淋洗和洗脱等固相萃取步骤,在最优固相萃取条件下,固相萃取柱能选择性的识别、俘获和富集0.5-10μmol/L的标准混标溶液中的雌二醇,回收率在71.16%-89.26%间,日内和日间RSD低于2.6%和1.73%。对加标的鸡、桔汁、鱼、猪、水的回收率分别为71.16%, 83.75%, 75.25%, 74.98%和89.26%。相对于C18固相萃取柱,雌二醇分子印迹柱萃取后的液体用HPLC检测有更优分离效果和回收率。以上研究结果表明,改良沉淀聚合法所合成的雌二醇分子印迹微球对模板分子雌二醇具有很强的亲和性和显著的选择性,可离线富集各种环境和生物样品中痕量的雌二醇,在雌二醇检测中具有实际的应用意义。
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