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独子藤(Celastrus monospermus Roxb.)是卫矛科南蛇藤属常绿藤本植物,主要含生物碱和三萜类化学成分,而木栓烷型三萜类化合物又是其中一个重要的组成部分。该化学成分具有多种生物活性。雷公藤红素(Celastrol)是天然木栓烷型三萜类化合物,具有抗肥胖、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗风湿、免疫抑制等多种药理活性。本文对独子藤中雷公藤红素的提取及纯化工艺进行了研究,该研究对雷公藤红素的开发利用和新药研发具有重要意义。1.建立了独子藤中雷公藤红素的HPLC含量测定方法,色谱条件为:反相C18色谱柱(Discovery,25cm×4.6 mm,5μm,Supelco.),流动相为甲醇-0.1%磷酸水=88:12,流速1 m L?min-1,检测波长425 nm,柱温30?C,进样量20μL。用外标法定量。2.采用超声波提取法,通过单因素实验,考察了溶剂种类,溶剂浓度,提取时间,提取温度,超声功率和液料比对独子藤中雷公藤红素提取效果的影响。结果表明,分别当提取溶剂为无水乙醇,提取时间为20 min,提取温度45?C,超声功率75 W,液料比为20 mL/g的时候雷公藤红素的提取效果最好。3.采用Box-Behnken Design设计实验方案,通过响应面法,进一步考察了提取时间,提取温度,超声功率和液料比对雷公藤红素提取率的影响,优化得到最佳提取工艺为以无水乙醇为提取溶剂,提取时间为20 min,提取温度为46?C,超声功率为60 W和液料比为30 mL/g,得到雷公雷红素的提取率3.116 mg/g。4.根据雷公藤红素的性质,确定了雷公藤红素的纯化工艺。经过预处理后的样品,首先进行聚酰胺(60-100目)柱层析,洗脱剂为甲醇:水=3:1,收集雷公藤红素馏分,浓缩得到红色粉末。所得红色粉末进行硅胶(200-300目)柱层析,洗脱剂为石油醚乙酸乙酯系统,洗脱梯度为5:1,2:1,1:1,点板收集雷公藤红素馏分,浓缩得深红色粉末,纯度不低于92%。深红色粉末再进行凝胶柱层析,洗脱剂为甲醇,流速为30 mL/h。经过三次柱层析,得到纯度大于98%的雷公藤红素。