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目的:本研究创新性地观察新型过氧化物酶Peroxiredoxin-1(Prx-1)在血管紧张素II(Angiotensin II,Ang II)诱导的心肌细胞肥大中的表达,及高表达Prx-1对Ang II诱导的活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)、Akt通路激活及心肌肥大的影响,以探讨Ang II是否通过ROS及其介导的Akt细胞内信号传导通路促进心肌细胞肥大。并首次探讨Prx-1是否通过抑制ROS/Akt通路来抑制Ang II的促心肌细胞肥大作用,为Prx-1成为防治心肌肥大的新靶点提供一定的实验依据。方法:一、观察脑钠素(brain natriuretic peptide,BNP)、ROS及prx-1在Ang II诱导的心肌细胞肥大中的表达。体外培养大鼠心肌细胞(H9C2),并随机分为对照组和Ang II组。在Ang II刺激3h、6 h、12 h、24 h、48h和72h用Real time PCR法进行检测BNP mRNA表达;在Ang II刺激10min、20min、30min、1h、2h和4h用二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)检测ROS水平;在Ang II刺激30 min、1 h、2h、4h和8h用western blot法检测Prx-1蛋白表达。二、利用Prx-1表达质粒转染心肌细胞使心肌细胞高表达Prx-1蛋白,并观察高表达Prx-1对Ang II诱导的心肌细胞肥大、ROS和Akt通路激活p-Aktser473影响。体外培养大鼠心肌细胞(H9C2)随机分为对照组、Ang II组、Ang II+转染对照组和Ang II+Prx-1转染组。采用脂质体转染法将Prx-1表达质粒转染心肌细胞。Ang II组、Ang II+转染对照组和Ang II+Prx-1转染组经Ang II刺激2h,四组细胞用western blot法检测Prx-1蛋白表达;Ang II组、Ang II+转染对照组和Ang II+Prx-1转染组经Ang II刺激24 h,四组细胞用Real-time PCR法检测BNP mRNA表达;Ang II组、Ang II+转染对照组和Ang II+Prx-1转染组经Ang II刺激20 min,四组细胞用DCFH-DA法检测ROS水平;Ang II组、Ang II+转染对照组和Ang II+Prx-1转染组经Ang II刺激1h,四组细胞用Western blot法检测磷酸化Akt(p-Aktser473)蛋白表达。结果:一、①与对照组比较,Ang II刺激3h、6 h、12 h、24 h、48h和72h的BNP mrna分别增长1.04±0.04倍、1.06±0.05倍、1.22±0.17倍、1.68±0.33倍、2.12±0.45和2.86±0.52倍,除angii刺激3h、6h和12h外,其它刺激时间点的差异均有统计学意义(p<0.05)。②对照组的ros水平为3673±343,angii刺激10min、20min、30min、1h、2h和4hros水平分别是4325±136、4742±271、4675±355、4155±364,4047±208和3580±382。与对照组比较,angii刺激10min、20min和30min时ros水平的差异有统计学意义(p<0.05)。③对照组prx-1蛋白的表达值为0.18±0.05,angii刺激30min、1h、2h、4h和8h时prx-1蛋白的表达值是0.30±0.07、0.41±0.12、0.49±0.09、0.38±0.05和0.33±0.07,与对照组比较,各刺激时间点的差异有统计学意义(p<0.05)。二、①prx-1表达质粒转染心肌细胞后心肌细胞prx-1蛋白表达:对照组prx-1蛋白表达值为0.27±0.03,转染对照组prx-1蛋白表达值为0.30±0.05,两者的差异无统计学意义(p>0.05)。与转染对照组比较,prx-1质粒转染组prx-1蛋白表达值为0.80±0.15,差异有显著性(p<0.05)。②bnpmrna表达:与对照组比较,angii组,angii+转染对照组和angii+prx-1转染组bnpmrna表达分别增高了1.70±0.25倍、1.83±0.28倍和1.35±0.24倍。与对照组比较,angii组bnpmrna明显增高,差异有统计学意义(p<0.05);与angii组比较,angii+转染对照组的表达无明显统计学差异(p>0.05),但angii+prx-1转染组的表达明显下降,差异有统计学意义(p<0.05)。③ros水平:对照组ros的荧光强度为3648±302,angii组荧光强度为4688±284,差异有统计学意义(p<0.05)。与angii组比较,angii+转染对照组荧光强度是4576±343,差异无统计学意义(p>0.05),但angii+prx-1转染组荧光强度是3824±255,差异有统计学意义(p<0.05)。④prx-1蛋白表达:对照组prx-1蛋白的表达值为0.25±0.03,angii组prx-1蛋白的表达值是0.70±0.11,差异有统计学意义(p<0.05)。与angii组比较,angii+转染对照组prx-1蛋白的表达值是0.77±0.18,差异无统计学意义(p>0.05),但angii+prx-1转染组的prx-1蛋白的表达值是1.56±0.24,差异有统计学意义(p<0.05)。⑤磷酸化akt水平:磷酸化akt的表达水平以p-akt和akt的比值表示。对照组p-aktser473蛋白的表达值为0.33±0.05,angii组p-aktser473蛋白的表达值是0.92±0.15差异有统计学意义(p<0.05)。与angii组比较,angii+转染对照组p-aktser473蛋白的表达值是0.86±0.18,差异无统计学意义(p>0.05),但angii+prx-1转染组的p-aktser473蛋白的表达值是0.56±0.12,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:1、Prx-1蛋白在Ang II诱导的心肌细胞肥大中的表达显著增加;ROS和p-Akt ser473在其中的表达也明显增加。2、Prx-1表达质粒转染心肌细胞使Prx-1高表达;高表达Prx-1可以明显抑制心肌肥大,并明显下调ROS和p-Akt ser473的表达;3、Ang II可能通过ROS/Akt途径诱导心肌细胞肥大;并且Prx-1可能通过降低ROS来抑制Akt通路的激活,从而抑制Ang II诱导的心肌细胞肥大。