【摘 要】
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目的:蜘蛛毒与蛇毒相比,含有较多的小分子多肽。蜘蛛毒素的研究已成为继蛇毒、蝎毒后的又一个研究热点。但由于蜘蛛毒素采集困难,量极少,因而对它的研究很难深入。目前仅有应用
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目的:蜘蛛毒与蛇毒相比,含有较多的小分子多肽。蜘蛛毒素的研究已成为继蛇毒、蝎毒后的又一个研究热点。但由于蜘蛛毒素采集困难,量极少,因而对它的研究很难深入。目前仅有应用蜘蛛毒素对食管癌,肝癌的报道。利用蜘蛛毒素作用脑肿瘤国内外还未见报道。本研究试图采用广西虎纹捕乌蜘蛛毒素抑制胶质瘤细胞株U251增殖,并阐明其初步作用机制,为进一步研究作基础。
方法:以10%胎牛血清的RPMI1640培养液于37℃、5%CO2培养箱中湿化孵育培养U251,采用细胞毒性实验(MTT法),通过半数抑制率(IC50)评价蜘蛛毒素对上述细胞的细胞毒作用,并与传统化疗药物比较。应用倒置相差显微镜及HE染色观察细胞形态及细胞核变化。采用原位末端标记法(TUNEL),通过计算细胞凋亡率评价不同浓度的蜘蛛毒素对U251细胞凋亡的影响。
结果:
广西虎纹捕鸟蛛毒素能够抑制胶质瘤细胞株U251的增殖,其48h及72h的IC50分别为81.20ug/ml和70.50ug/ml,且呈明显的量-效及时-效关系,优于传统化疗药顺铂。形态学观察到胶质瘤细胞肿胀,变圆,细胞核溶解,细胞内一片红染的坏死现象;部分细胞核呈新月形,可见固缩、碎裂的凋亡征象。原位末端标记法(TUNEL)可见凋亡的胶质瘤细胞核染成棕黄色,浓度为300ug/ml、200ug/ml、100ug/ml的凋亡率分别(58.75±6.98)%、(49.77±4.89)%、(38.10±7.94)%,明显优于对照组.
结论:本研究表明虎纹捕鸟蛛毒素能够抑制胶质瘤细胞U251增殖。其抑制作用机制主要通过促进细胞坏死及诱导细胞凋亡实现。广西捕鸟蛛毒素有可能是一种具有抗肿瘤作用的天然药物,其抗肿瘤作用的分子机制有待进一步研究。
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