论文部分内容阅读
目的：探讨酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）对高脂高糖、链脲佐菌素（STZ）诱导的高血糖小鼠溃疡的疗效及机理，剖析临床糖尿病病人溃疡面的超微结构的变化。 方法：构建高血糖小鼠溃疡模型，昆明种小鼠40只，按随机数字表抽取10只为正常对照组(喂养普通饲料)，其余小鼠在高脂高糖饮食的诱导下，四周后夜间禁食12h，空腹腹腔注射STZ溶液，正常组注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，STZ注射7天后检测，夜间禁食不禁水，小鼠尾静脉取血，空腹血糖＞16.7mmol/L造模成功，血糖稳定一周后，每组小鼠均在背部单侧制造直径约6mm的皮肤溃疡模型，并记为第0天。其余30只，按随机数字表分为高血糖组（H组）、高血糖酸性成纤维细胞生长因子治疗组（HF组）、高血糖+阻滞剂组（HP组），每组10只。于第3、6、9天评估各组小鼠的创面愈合率，HE染色观察肉芽组织的厚度，免疫组化检测CD34、VEGF、ERK、FGFR的表达。采用Western blot法检测FGFR、ERK在创伤组织中的表达，RT-PCR法检测FGFR、VEGF的表达。选取两个糖尿病患者溃疡面的正常组织，戊二醛固定，做透射电镜，观察细胞器的变化。 结果：HF组的创面愈合率明显高于H组(P<0.05)，且接近于正常溃疡组织的创面愈合率，HP组的创面愈合率低于H组与HF组(P<0.05)。免疫组化中：CD34和VEGF的表达HF组高于H组，接近于C组，HP组明显低于C组和H组(P<0.05)；ERK和FGFR的表达HF组高于H组、HP组的表达低于H组和HF组(P<0.05)，ERK的变化早于FGFR的变化，有可能是PD98059阻滞了ERK的作用，FGFR的变化稍迟一些。蛋白印迹检测的ERK和FGFR的情况与免疫组化检测的这两项指标基本一致。RT-PCR检测的FGFR和VEGF与Western Blot检测的FGFR、免疫组化检测的VEGF基本一致。外用酸性成纤维细胞生长因子对溃疡的作用，随时间变化作用增强，注射ERK抑制剂PD98059后，对创面的作用随时间也在增强，抑制的作用也越明显。两例临床病例分析得出，其中1例粗面内质网稍有扩张，另1例线粒体部分膜和嵴消失或融合。 结论：酸性成纤维细胞生长因子促进高血糖小鼠溃疡的愈合，FGF可以促进VEGF的表达，注射了ERK的抑制剂PD98059后，在一定程度上抑制了溃疡面的愈合，并抑制了VEGF的表达，FGF的信号通路和VEGF的信号通路在ERK这条通路上重合，而且作用强，可能两者的信号通路也有不同，为进一步探讨糖尿病溃疡愈合的机制奠定了基础。两个临床病例得出，第1例电镜显示成纤维细胞长梭形，细胞周围有大量胶原，细胞核长椭圆形，核较大，胞质丰富，成纤维细胞结构较好，粗面内质网稍有扩张，第2例电镜显示线粒体部分膜和嵴消失或融合。