【摘 要】
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目的：对传统组织块法培养兔晶体上皮细胞进行改良,观察原代和传代晶体上皮细胞的生物学特征和组织学变化。
方法：选2-3只成年健康白兔,雌雄不限,空气栓塞处死后无菌条件下
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目的：对传统组织块法培养兔晶体上皮细胞进行改良,观察原代和传代晶体上皮细胞的生物学特征和组织学变化。
方法：选2-3只成年健康白兔,雌雄不限,空气栓塞处死后无菌条件下取出晶状体,无菌显微剪剪除角膜,放射状剪开虹膜,离断晶体悬韧带,取出完整晶体。将晶体前囊膜面向下在含20％胎牛血清的DMEM-F12培养基中培养,培养12小时后去除晶体后囊及皮质,只保留晶体前囊膜及少量晶体。当原代培养的晶体上皮细胞在培养板中长至融合后,胰酶混合液1ml,在37℃,5％CO2孵箱内消化至初显贴壁圆形,按1:2的比例进行传代。采用倒置显微镜观察活体细胞的增殖活动和形态学变化。
结果：原代培养约48小时后,可见囊膜边缘有晶体上皮细胞爬出,贴壁生长,近囊膜处细胞生长密集,呈不规则多角形的上皮细胞形态,约一周左右细胞长至融合。消化后按1:2传代。细胞一般24 h内贴壁,约3～4 d细胞可达融合,融合的细胞呈多角形、椭圆形,大小基本一致。
结论：本方法对传统的组织法培养晶体上皮细胞在取材,晶体前囊贴壁等步骤进行了改进,克服了以往组织块法培养晶体上皮细胞的种种弊端,使晶体上皮细胞的培养更为简便,且节省材料。
应用改良的组织块培养的晶体上皮细胞,具有正常晶体上皮细胞的形态特征,可以进行传代培养。
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