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乌鸡白凤膏依据乌鸡白凤胶囊组方改剂型而来,由乌鸡、地黄、丹参、白芍、香附(醋制)、人参、黄芪、甘草、银柴胡、鳖甲、鹿角霜、煅牡蛎十二味药材组成,具有养血、滋阴助阳等功用。乌鸡白凤膏原质量标准只有:丹参、人参、甘草三味药材薄层鉴别;芍药苷含量测定,随着中医药事业的发展,为达到产品质量稳定、安全有效、顺应性强的要求,本课题对乌鸡白凤膏质量标准进行提升,在原标准三味药材的定性鉴别基础上,新增了地黄、黄芪、香附三味药材鉴别;由芍药苷含量测定提升为同一液相条件下同时测定有效成分丹参素、芍药苷含量;新增了乌鸡白凤膏低聚肽含测方法;新增了乌鸡白凤膏特征图谱的测定,拟定了新的乌鸡白凤膏质量标准,主要研究内容如下:(1)本课题新增了地黄、黄芪、香附三味药材的薄层鉴别,并对原标准中人参鉴别方法优化,可在同一薄层条件下同时鉴别人参、黄芪两味药材,完成了组方中六味药材(地黄、黄芪、香附、丹参、人参、甘草)薄层鉴别方法研究,均无阴性干扰,稳定性、耐用性良好,符合中国药典药品质量标准分析方法相关规定。(2)同一液相条件下同时测定有效成分丹参素、芍药苷含量,对供试品制备方法进行考察,对色谱条件:检测波长、固定相、流动相组成、柱温等进行考察,最终确定的含测条件经方法学考察和三批中试样品验证,建立的丹参素、芍药苷含量测定方法操作简便、可行,符合中国药典药品质量标准分析方法相关规定。(3)方中君药乌鸡经酶解工艺将蛋白质转化为低聚肽类物质,本研究参考GB/T22729-2008低聚肽含量测定思路,蛋白含量减去游离氨基酸含量即为低聚肽含量:蛋白含量测定采用凯氏定氮法,游离氨基酸含量测定是ACCQ.Tag柱前衍生法。通过对样品制备方法、色谱条件优化,最终建立的低聚肽含量测定方法经方法学考察,各项试验测定结果均良好;并完成了乌鸡白凤膏三批中试样品中低聚肽测定,建立的低聚肽含测方法可较好地用于乌鸡白凤膏质量控制。(4)采用高效液相法建立了乌鸡白凤膏特征图谱,并进行了方法学考察、相似度评价、色谱峰归属试验,确定了18个特征峰归属于五味药材:地黄、丹参、白芍、甘草、银柴胡,并指认出丹参素、丹酚酸B、芍药内酯苷、芍药苷、异甘草苷、甘草素六个色谱峰,为产品质控提供试验依据。