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目的:鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(Sinonasal inverted papilloma,SNIP)是一种起源于鼻腔鼻窦粘膜上皮的良性肿瘤,但具有局部侵袭性,复发率高和易恶变等特征,其发病及复发和恶变的机制尚未明确。
生存素Survivin是新近发现的一种凋亡抑制基因,其表达的蛋白是凋亡抑制蛋白家族的新成员,具有抑制细胞凋亡的作用,并在细胞的有丝分裂及胞质分裂过程中起着重要的作用。研究表明survivin是一个肿瘤特异性的凋亡抑制基因,在胚胎发育过程中和人的肿瘤组织中表达,而在成熟的终末分化组织中表达降低或缺失。增殖细胞核抗原(PCNA)是DNA聚合酶δ的辅助因子,参与DNA的合成,在细胞周期调控中起重要作用。PCNA的周期性变化与细胞增殖过程有关,在调节细胞增殖和恶性疾病的发生发展中起重要作用。PCNA在SNIP中的研究,目前在国内尚处于初步研究阶段;而对Survivin的研究多集中于肿瘤中,在SNIP中的研究国内文献中尚未见报道。
本实验主要研究细胞凋亡抑制蛋白Survivin和增殖细胞核抗原PCNA在SNIP中的表达及其临床意义,探讨两者之间有无关联及它们与鼻内翻乳头状瘤复发、恶变的内在联系。
方法:实验组选取2005-2008年在河北医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科收治的SNIP患者,手术切除、临床资料及随访记录完整、复习原HE染色病理切片证实的可评价病例45例。其中男性31例,女性14例。年龄45~73岁,平均56.7±5.8岁。正常鼻粘膜组选取鼻中隔偏曲并对侧下鼻甲增生肥大影响通气,在我科行下鼻甲部分切除术患者10例。SCC组同样选取在我科收治的鼻腔鼻窦鳞状细胞癌(Squamous Cell Carcinomas,SCC)患者的组织蜡块共10例。全部标本分为三组,即正常鼻粘膜组、SNIP组、及SCC组。而SNIP组又分为初发组、复发组和恶变组。每例标本以5μm厚度连续切片,分别行survivn和PCNA免疫组织化学染色。石蜡切片经常规二甲苯脱蜡,梯度酒精至水,去除内源性过氧化物酶,抗原修复,二步法免疫组化检测。将DAB底物工作液滴加于切片上,镜下观察显色结果。苏木素复染,脱水透明,中性树胶封片。
统计学处理:等级资料采用Kruskal-Wallis秩和检验进行多组分析,并采用Wilcoxon秩和检验进行两两比较。Survivin及PCNA的关联性采用Spearman等级相关分析。所有数据用SPSS13.0软件进行运算处理,以p<0.05为差异具有显著性。
结果:Survivin在正常鼻粘膜组、SNIP组和SCC组中的表达具有显著差异性。Survivin在SNIP无不典型增生组、有不典型增生组和恶变组中的表达逐渐增多,在各组间的表达有显著差别。同时经两两比较后,显示Survivin在无不典型增生组与有不典型增生组、无不典型增生组与恶变组之间有显著性差异。Survivin在SNIP初发组、复发组、恶变组及SCC组中的表达逐渐增强,在各组间表达差别有显著性。经秩和检验两两比较,显示Survivin的表达在SNIP初发组与SNIP恶变组,SNIP初发组与SCC组之间均有显著性差异,其它两组之间的表达无明显差异。
PCNA在正常鼻粘膜组、SNIP组、SCC组中的表达具有显著性差别。PCNA在SNIP无不典型增生组与有不典型增生组、无不典型增生组与恶变组中的表达亦有显著性差异。PCNA在SNIP初发组、复发组、恶变组及SCC组中的表达逐渐增强,在各组间表达差别有显著性。又经两两比较后,显示PCNA在SNIP初发组与恶变组、SNIP初发组与SCC组之间有明显差异,而其它两组之间的表达无明显差异。
结论:
1 SNIP虽然是良性肿瘤,但其具有高复发、易恶变的特点,在临床治疗上应引起足够的重视。
2 Survivin在SNIP中表达增高,且与SNIP的不典型增生呈正相关。从SNIP初发、SNIP复发到恶变SNIP和SCC组织之间,Survivin的表达逐渐增多,并在SNIP的恶变中起重要作用,可以作为SNIP有可能发生癌变的诊断指标。
3 PCNA在SNIP中具有高表达的特性,提示细胞增殖与SNIP的发生可能有关,并且可以反映SNIP病理组织分化的程度。从SNIP初发、SNIP复发到恶变SNIP和SCC组织之间,PCNA的表达逐渐增强,提示PCNA通过细胞增殖促进SNIP肿瘤细胞的迅速发展,并导致良性肿瘤恶性变,PCNA的过度表达成为SNIP恶变的早期事件之一。
4通过检测Survivin和PCNA,对于SNIP的诊断及预后评价有着重要参考价值,并为SNIP的治疗提供了新思路和有效方法。同时,Survivin和PCNA在SCC中的过度表达,也能为SCC的临床治疗开辟新途径。