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鼻腔鼻窦恶性肿瘤总体发病率较低,其中以鳞状细胞癌最常见。鼻腔鼻窦鳞状细胞癌(sinonasal squamous cell carcinoma, SNSCC)多为单侧发病,并表现为一侧鼻腔呈进行性鼻塞等常见症状,双侧同时发病者较为罕见。鼻腔鼻窦恶性肿瘤总体5年生存率较低,约为40%,并且其发病的分子生物学机制和病理学基础还尚不十分明确。所以,由于其起病隐匿、治疗手段局限和预后较差等原因,一直受到临床医师的广泛关注。 微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein7,MCM7)作为MCMs家族中的重要一员,不仅参与多种限速酶的构成及功能调节,而且还作为执照蛋白参与DNA复制,调节细胞增殖活动。目前,针对该因子的研究主要集中在消化和生殖系统恶性肿瘤等方面,并且发现MCM7的差异化表达与多种肿瘤患者的预后相关,然而在SNSCC方面的相关研究尚属空白。 目的:本研究旨在通过应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术检测MCM7在SNSCC等组织中的表达水平,来探讨其在SNSCC发病机制中的作用及临床意义,以求指导临床早期诊断及合理治疗。 材料与方法:1、材料:收集2010年12月~2016年5月于中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科门诊活检及住院手术切除并经病理证实为SNSCC存档蜡块54例,为实验组。其中,男39例,女15例,年龄范围39~81岁,平均年龄57.9岁。其中,住院患者41例,7例未接受手术治疗。收集2016年4月于中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科接受住院手术治疗的慢性鼻窦炎患者鼻息肉(nasal polyps,NP)组织10例,为对照组。其中,男女各5例,年龄范围23~54岁,平均年龄35.6岁。 2、方法:每个蜡块按4μm厚度连续切片3张。 (1)苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin,H-E)染色:第1张切片进行常规H-E染色。由有经验的病理科医师阅片,并再次确诊,重新划分细胞分化程度。 (2) IHC染色:第2张切片采用S-P三步法进行MCM7 IHC染色。连续切片的第3张留存备用。 IHC结果判断:MCM7以胞核着棕黄色为阳性。每张切片高倍镜(400倍)随机观察5个视野计数细胞数,每个视野细胞数不少于200个,并计算每张切片阳性细胞所占百分比的平均值,即阳性细胞指数(Labeling Index,LI),结果以(x)±s表示。并且,以LI≥0.76为阳性。 (3)临床资料整理:收集纳入研究的全部肿瘤住院患者病历,整理相关资料。疾病诊断方法根据国际抗癌联盟TNM分类标准第7版进行重新整理。 (4)肿瘤患者的治疗及随访:全部Ⅰ、Ⅱ期和部分Ⅲ期SNSCC患者采用鼻内镜鼻腔鼻窦肿瘤切除术,部分Ⅲ期和全部Ⅳ期患者均采用鼻侧切开或上颌骨切除术,或根据具体情况采取扩大切除术,或根据患者及家属意愿采取适当手术方式治疗,术后联合放射治疗。患者出院后定期随访至2016年11月1日。34例SNSCC手术患者均参加随访,失访3例,失访率为8.82%;最终死亡15例,死亡率44.12%。全部患者生存时间4.13~70.60个月,中位生存时间为38.77个月。 3、统计分析:采用SPSS22.0软件包分析处理数据。计量资料采用(x)±s表示,两个独立样本的比较采用Mann-Whitney U检验。生存分析采用Kaplan-Meier和LogRank检验。所有结果均以P<0.05为差异有统计学意义。 本研究已通过中国医科大学附属第一医院医学科学研究伦理委员会的伦理审批[科伦审[2017]110号]。 结果:(1)在NP中,MCM7的表达率较低(LI=0.5729±0.0403),并且表达MCM7的细胞分布具有规律性,主要位于上皮基底层。(2)在SNSCC中,MCM7表达水平较高(LI=0.7850±0.1208),并且表达MCM7的细胞呈弥漫性分布,无明显规律。(3) SNSCC与NP比较,差异有统计学意义(P=0.000),MCM7在SNSCC中的表达水平明显高于NP。(4) MCM7的表达与肿瘤分化程度有关(P=0.001),随着肿瘤分化程度的降低MCM7表达水平逐渐增高。MCM7表达水平与患者性别(P=0.074)、年龄(P=0.971)、吸烟史(P=0.397)、临床分期(P=0.656)、颈淋巴结转移(P=0.431)和原发部位(P=0.478)无关。(5) SNSCC患者的3年、5年生存率分别为61.3%和46.0%。其中,Ⅲ~Ⅳ期患者的3年和5年生存率分别为51.3%和20.9%。MCM7阴性患者3年、5年生存率为36.0%和18.0%,而阳性患者3年、5年生存率为59.9%和34.2%,差异无统计学意义(P=0.297)。 结论:(1) MCM7在SNSCC中表达水平显著提高。(2) MCM7表达水平与肿瘤分化程度有关,随肿瘤分化程度下降MCM7表达水平逐渐增高。(3) SNSCC的生存率与MCM7表达水平无关。