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坛紫菜是我国一种重要的栽培种类。其味道鲜美,也是一种很好的保健食品。目前,坛紫菜丝状体细胞工程化育苗还没有真正实现。本文以坛紫菜自由丝状体为培养对象,500mL三角烧瓶模拟光生物反应器和10L经济型光生物反应器作为培养装置,进行了光生物反应器培养坛紫菜自由丝状体条件优化的试验,为人工控制下大量培养自由丝状体和自由丝状体直接成苗提供参考。
单因子试验确立了培养自由丝状体的适宜温度范围为19~23℃,适宜光周期(L/D)(单位:hr)为14:10,适宜光辐照度为20μEm-2S-1,适宜添加KNO3浓度100mg/L,K2HPO4浓度10mg/L。多因子试验表明:温度、光周期和光辐照度效应均存在显著性差异,温度与光周期,温度与光辐照度,光周期与光辐照度之间存在显著性差异。最优组合为培养温度21℃、光周期(L/D)(单位:hr)14:10、光辐照度20μEm-2S-1组。
优化自由丝状体扩大培养试验的结果表明:光生物反应器适合于自由丝状体的培养;利用光生物反应器培养自由丝状体时,接种密度为2±0.02g/L时,非补料培养就可以提供充足的营养盐,而每天添加营养盐并不能起到促进自由丝状体生长的作用;与500mL三角烧瓶模拟光生物反应器相比,经济型光生物反应器培养自由丝状体的培养效果略好。
进行了自由丝状体诱导形成孢子囊枝的初步试验,结果表明:在室内人工能够控制自由丝状体的发育;静置条件下,K2HPO4的浓度为10~30mg/L时,比较适合自由丝状体的发育,而K2HPO4的浓度为40mg/L以上时,对自由丝状体发育没有促进作用;自由丝状体在保种条件下仍处于发育的激活状态。