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目的：微小RNA(microRNA, miRNA)是一类非编码调控单链小分子RNA,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合对靶基因进行转录后水平调控。近年来的多项研究表明,某些miRNA具有抑癌基因或癌基因活性,这些miRNA通过负调控其靶基因的表达水平,在肿瘤发生和发展过程中发挥极其重要的作用。本课题利用实时定量PCR (real-time PCR)方法,发现在人胃腺癌组织中microRNA-9(miR-9)发生明显上调。随后进一步研究miR-9对胃腺癌细胞生长表型的影响,并确定miR-9直接作用的靶基因,并且研究了该靶基因对胃腺癌细胞生长表型的影响,以阐明miR-9在胃腺癌发生和发展过程中发挥作用的分子机制。方法：首先利用real-time PCR方法检测miR-9在人胃腺癌组织和癌旁正常组织中的差异表达,然后在人胃腺癌细胞系MGC803细胞中,通过过表达miR-9水平增强其功能后,利用MTT实验和集落形成实验分别检测细胞生长活性和增殖能力的变化并利用免疫功能缺陷型裸鼠移植瘤实验检测活体内肿瘤生长变化。而后利用生物信息学方法筛选miR-9的候选靶基因,并利用荧光报告载体实验验证miR-9对靶基因的直接调控作用。利用real-time PCR和western blot实验技术检测miR-9功能增强的胃癌细胞或组织标本中靶基因mRNA和蛋白水平的表达变化,进一步验证miR-9对靶基因的调控作用。而后又利用RNA干扰技术使靶基因表达沉默后,通过MTT实验和集落形成实验分别检测细胞生长活性和增殖能力的变化,进一步研究了该靶基因的功能。结果：Real-time PCR结果显示,miR-9在人胃腺癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织。在MGC803细胞中,过表达miR-9后,细胞生长活性明显受抑制,且是一种浓度依赖性的方式；集落形成能力明显降低；肿瘤生长速度显著下降。靶基因筛选结果表明,作为一种肿瘤相关基因,核转录因子kappaB1(NF-κB1)是miR-9的候选靶基因,其3’非翻译区包含miR-9的潜在结合位点。荧光报告载体实验证实,miR-9能够通过作用于NF-r,B1基因的3’非翻译区对其表达进行负性调节。而在miR-9功能增强的胃癌细胞或组织中,NF-κB1基因的mRNA表达水平和蛋白表达水平都有明显降低。在MGC803细胞中,NF-κB1表达沉默后,细胞生长活性明显受抑制；集落形成能力也明显降低。结论：在胃腺癌细胞中,miR-9能够抑制细胞增殖,起到抑癌基因的作用。胃腺癌中异常低表达的miR-9下调肿瘤相关基因NF-κB1的表达水平的能力降低,使NF-κB1的促增殖活性增强,造成细胞生长速度加快。通过阐明miR-9在胃腺癌中的具体作用机制有利于我们对恶性肿瘤的发生和发展进行深入的了解,同时也为肿瘤的诊断和治疗提供新依据。