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水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)是纤细病毒属(Tenuivirus)的代表成员,它所引起的水稻条纹叶枯病(Rice stripe disease)是我国水稻生产上最重要的病毒病。近几年来由于气候的变化、种植结构的调整和品种抗病性的丧失,该病在我国北方稻区发生日趋严重,给水稻生产造成了严重的经济损失。 本论文鉴定了我国北方水稻条纹叶枯病常发区的25个水稻主栽品种(系)和育种高代材料对RSV江苏分离物(RSV-JS)的抗病性;利用无毒灰飞虱取食冰冻的水稻标样,将-20℃冰冻毒源接种到水稻感病植株上,复活了冰冻毒源;研究了RSV分离物外壳蛋白(coat protein,CP)和特异性蛋白(disease-specific protein,SP)基因的分子变异。主要结论如下: 1、通过苗期人工接种的方法,对来自河南、河北、安徽、山东等省的25个生产主栽品种(系)和育种高代材料进行了抗病性研究。结果表明,水晶3号、扬粳9538、垦稻95-4、鲁禾0218四个粳稻品种和04G886、04G1020两个籼稻品种表现高抗(high resistance,HR),占供试品种的24%;04G824、鲁禾301、镇稻88和新品系V6等四个粳稻品种(系)表现出中等抗性(moderate resistance,MR),占供试品种的16%;其余60%品种均表现感病。 2、RSV-JS分离物接种不同水稻品种表现不同的症状,说明了水稻条纹病毒的表现症状展叶型和卷叶型与水稻品种的抗病性紧密相关。 3、利用无毒灰飞虱取食冰冻的水稻条纹叶枯病标样,成功的将冰冻毒源接种到水稻植株上,为RSV致病性研究创造了基础。 4、对34个RSV分离物CP基因序列分析结果表明,所有分离物CP基因均由969nts组成,编码322个氨基酸。多重序列比对分析表明本研究测定的34个北方分离物与已报道的云南4个分离物YBS2、YYX、YYL1、YYL2和日本T分离物的CP基因核苷酸序列同源性达93.9%~100%。根据CP基因核苷酸序列的同源性,39个分离物可以分为两组,第一组包括云南的4个分离物,第二组包括其它分离物。北方的34个RSV分离物CP基因核苷酸序列同源性在96.8%~100%之间,分组并不明显。系统进化分析表明,RSV CP基因核苷酸变异与分布的地域没有必然的联系,且在2年之内变异不大。 5、氨基酸序列比对结果表明,39个RSV分离物CP蛋白氨基酸的同源性在96.3%~100%之间,其中22个分离物之间氨基酸序列同源性为100%,这些分离物包括了我国北方6省9个地区大部分的分离物,初步说明这一组分离物是我国北方的RSV优势种群。 6、对RSV CP基因变异较大的的12个分离物SP基因进行了序列测定。结果表明,所测定的RSV SP基因均由537nts组成,共编码178个氨基酸。SP基因的变异主要发生在第三个密码子上,同义突变率高。多重序列比对分析表明,本研究所测定的RSV分离物与已报道的云南宜良YYL1和日本T分离物14个分离物间SP基因的核苷酸序列同源性在73.2%~100