论文部分内容阅读
前言 随着生殖医学的飞速发展，人类对不孕的诊治水平已大大提高，但仍有一部分不明原因不孕妇女的生育问题尚未得到解决，其中胚胎着床失败是问题的关键之一，而胚胎能否着床则要看胚胎质量和子宫内膜容受力及其二者是否同步。虽然评价子宫内膜的金标准仍是黄体期内膜活检，但已有越来越多的证据表明临床分期与组织学分期一致的子宫内膜并不能完全代表其功能正常或反映其容受力。一些细胞因子如整合素（αγβ3）、环化合酶-2（COX-2）、降钙素（CT）、白血病抑制因子（LIF）等均在分子水平上影响着着床期的子宫内膜容受力。通过针对性的基因治疗，可以提高着床成功率。目前，有关子宫内膜容受力的分子水平的研究已成为生殖医学的研究热点。 同源框基因（HOX）是一类转录调节基因，其蛋白通过激活或抑制下游基因的表达在胚胎发育中起着促进体节发育、决定组织分化的作用，HOXA10基因是HOX基因家族中AbdB亚家族成员之一。在小鼠，HOXA10基因缺陷表现为子宫性不孕，故其在生殖内分泌领域的作用引起学者的关注。目前，国内外对于HOXA10基因在人类这方面作用的研究甚少。Taylor等发现其在人类子宫内膜的增生期和分泌早期低表达，而于分泌中期和晚期表达水平急剧上升，这种特征性的表达时相提示HOXA10基因在人类子宫内膜容受力形成方面可能具有重要作用。通过研究HOXA10基因在不明原因不孕妇女子宫内膜上的表达特点，可能为进一步阐明其在子宫内膜容受力形成方面的作用提供理论依据。 实 验 材 料 不孕门)组子宫内膜组织取自于本院妇产科生殖中心就诊的28例不明原因不孕妇女，监测排卵确定排卵日，于排卵后刮取近宫底处子宫内膜，分泌中期诊刮者同时行血孕酮水平测定，以排除黄体功能不全（LPD人正常生育（NF）组子宫内膜组织取自因单发子宫肌瘤而于本院妇产科住院手术的已育患者20例，无自然流产史，月经规律，未置环，于分泌期手术刮取正常肌壁侧近宫底处内膜组织。标本取自 2002年 1月－10月，各组年龄无显著性差异，术前3个月末用过激素类药物。所取之内膜组织立即用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋。行HE染色后光镜下依Noyes标准判定组织学分期，继后进行分组。 实 验 方 法 采用分子原位杂交技术，检测28例IF妇女和20例NF妇女分泌早中期子宫内膜上HOXA10 mRNA的表达水平。石蜡切片脱腊至水，蛋白酶消化后，加人HOXA10 mRNA寡核昔酸探针，使其与组织内HOXA10 mRNA杂交，之后加人一系列抗体，最后经DAB显色。同时设空白对照片，除不加探针外，其余步骤同上。胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性表达，再用图像分析系统测定显色区灰度阳性单位（PU）相对值的平均值，应用统计分析软件进行分析。 结 果 HOXA10 mRNA在两组子宫内膜的腺体和间质上均有表达， ·2·定位于胞浆，呈棕黄色颗粒，核旁胞浆表达较集中。IF组分泌早中期子宫内膜上 HOXA10 mRN＊表达的 PU值在腺体为 6．61。0．17、6．60 L 0．22，间质为6．40 t 0．52、6．30 t 0．18，两期表达无显著差异仲＞O．05h＊F组分泌早中期子宫内膜上＊0＊AIO m RNRNA表达的 PU值在腺体为 6．66。口．豆二、10．95。0．95，间质为 6．76 L 0．13上．49ti．33，分泌中期 HO）［A10 mRNA表达的PU值显著高于分泌早期h＜0．05八 IF组分泌中期 HOXA10 mRNA表达的 PU值显著低于 NF组同期水平h＜0．05人 结 论 ＊不明原因不孕妇女分泌中期子宫内膜上HOXA10 mRNA的表达水平显著下降。 2．子宫内膜HOXA10基因在分泌中期的高表达可能和子宫内膜容受力密切相关，其表达缺陷可能是导致不明原因不孕的重要原因之一。