【摘 要】
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背景:心血管疾病和恶性肿瘤是死亡事件的两个主要原因。抗肿瘤药物在肿瘤治疗中扮演着重要角色。新型抗肿瘤药即抗血管新生性靶向药物的问世极大地改善了肿瘤患者的生存率,但其中许多药物对心血管系统具有不同程度的损害作用。甲磺酸阿帕替尼是我国自主研制的血管内皮生长因子抑制剂,存在对血管及心脏的影响。关于阿帕替尼抗肿瘤时所引起的心脏损害研究较少,其机制仍存在许多地方值得商榷。目的:探索Ras同源基因家族成员A（
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背景:心血管疾病和恶性肿瘤是死亡事件的两个主要原因。抗肿瘤药物在肿瘤治疗中扮演着重要角色。新型抗肿瘤药即抗血管新生性靶向药物的问世极大地改善了肿瘤患者的生存率,但其中许多药物对心血管系统具有不同程度的损害作用。甲磺酸阿帕替尼是我国自主研制的血管内皮生长因子抑制剂,存在对血管及心脏的影响。关于阿帕替尼抗肿瘤时所引起的心脏损害研究较少,其机制仍存在许多地方值得商榷。目的:探索Ras同源基因家族成员A（RhoA）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）信号通路是否通过核因子-κB（NF-κB）通路参与阿帕替尼治疗胃癌时引起的心肌损伤。研究ROCK通路抑制剂Y27632是否能够预防或延缓阿帕替尼所导致的心脏损害,从而证实其对该种类型心脏损害是否具有治疗作用。方法:应用Balb/c裸鼠24只进行人胃癌细胞系MKN-45肿瘤造模,并分别予以阿帕替尼和/或Y27632治疗。随机分为4组:（1）空白对照组（n=6）:生理盐水灌胃（2ml/kg/d）;（2）单纯肿瘤组（n=6）:生理盐水灌胃（2ml/kg/d）;（3）阿帕替尼组（n=6）:阿帕替尼50mg/kg/d溶于2ml生理盐水灌胃;（4）阿帕替尼+Y27632组（n=6）:阿帕替尼50mg/kg/d溶于2ml生理盐水灌胃,随后予以Y27632 10mg/kg/d腹腔注射。造模成功后,予以药物干预21天。HE染色及Masson染色评估裸鼠心肌细胞病理改变;Western blot检测心肌组织RhoA、ROCK1、NF-κB p65、白介素6（IL-6）和白介素1β（IL-1β）蛋白的表达水平;qRT-PCR测定心肌组织RhoA、ROCK1、NF-κB p65、IL-1β和IL-6基因的表达。应用Graphd Pad Prism5进行统计学分析及绘图,Image J软件对蛋白条带进行半定量分析。结果:应用人胃癌细胞系MKN-45对Balb/c裸鼠造模,待肿瘤生长至体积为100-150mm~3时予以药物干预,并经过HE染色证实为胃癌细胞。（1）与空白对照组比较,单纯肿瘤组心肌组织中RhoA、ROCK1、NF-κB p65、IL-1β和IL-6蛋白及基因的表达水平均升高（P均＜0.05）。（2）与单纯肿瘤组比较,阿帕替尼组心肌组织RhoA（1.03±0.07 vs 1.23±0.06）和ROCK1（0.73±0.03 vs 1.05±0.04）蛋白及RhoA（1.25±0.09 vs 1.90±0.09）和ROCK1（1.41±0.05 vs 1.64±0.06）基因的表达水平升高（P均＜0.05）;给予Y27632干预后,RhoA（1.23±0.06 vs 1.08±0.03）和ROCK1（1.05±0.04 vs 0.74±0.05）蛋白及RhoA（1.90±0.09 vs 1.28±0.05）和ROCK1（1.64±0.06 vs 1.37±0.06）基因表达水平较阿帕替尼组降低（P均＜0.05）。（3）阿帕替尼组NF-κB p65（1.62±0.15 vs 2.46±0.16）、IL-1β（1.76±0.14 vs 2.64±0.07）和IL-6（1.62±0.04 vs 2.6±0.12）蛋白及NF-κB p65（1.29±0.03 vs 1.46±0.07）、IL-1β（1.12±0.05 vs 1.40±0.04）和IL-6（1.37±0.02 vs 1.94±0.04）基因表达均高于单纯肿瘤组（P均＜0.05）;给予Y27632干预后,与阿帕替尼组比较,NF-κB p65（2.46±0.16 vs 1.96±0.11）、IL-1β（2.64±0.07 vs 1.73±0.08）和IL-6（2.6±0.12 vs1.85±0.04）蛋白及NF-κB p65（1.46±0.07 vs 1.31±0.03）、IL-1β（1.40±0.04 vs1.04±0.07）和IL-6（1.94±0.04 vs 1.19±0.10）基因表达均降低（P均＜0.05）。结论:阿帕替尼治疗胃癌时可以引起肿瘤裸鼠的心肌损伤,RhoA/ROCK通路可能参与其中,应用ROCK通路抑制剂Y27632能够减轻阿帕替尼所致的心肌损伤,RhoA/ROCK通路有望成为阿帕替尼引起心肌损伤的潜在治疗靶点。
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