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背景:肝细胞肝癌是一种我国常见的恶性肿瘤,在我国肝癌的发病率高居第四位,死亡率高居第二位。肝癌患者多起病隐匿,绝大部分就诊时已处于中晚期,错过手术治疗最佳时机,单纯依靠化疗,无论是单剂或是联合化疗,效果均不理想,最终导致肝细胞癌疗效差,死亡率高。因此,全面深入研究肝细胞癌发生发展过程中的分子调节机制,对于肝癌的早期诊断、转移预测以及干预治疗均具有重要的意义。精氨基琥珀酸裂解酶(ASL)是尿素循环的重要组成部分,ASL参与了多种肿瘤的进展。然而,ASL与肝癌生长的关系尚不明确。目的:研究ASL对肝癌细胞增殖和凋亡的影响;初步阐明ASL调控肝癌细胞凋亡的分子机制。方法:1.通过qRT-PCR和Western blot检测多个肝癌细胞系、永生化肝细胞MIHA、原代肝细胞PHH,肝癌组织及癌旁组织中ASL的mRNA和蛋白质水平。2.台盼蓝排斥实验检测ASL沉默对肝癌细胞增殖的影响,平板集落实验检测沉默ASL对肝癌细胞集落形成的影响,软琼脂实验检测沉默ASL对肝癌细胞锚定非依赖生长能力的影响,流式细胞术和Western blot检测ASL沉默对肝癌细胞凋亡的影响。3.利用qRT-PCR分析ASL沉默后肝癌细胞中凋亡相关基因的mRNA水平,Western blot检测ASL沉默后Bax凋亡通路相关基因的蛋白质水平,台盼蓝排斥实验和流式细胞术检测Bax沉默是否减弱ASL下调对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。结果:1.实验结果显示肝癌细胞系中的ASL的mRNA和蛋白质水平明显高于永生化肝细胞和原代肝细胞,并且在肝癌组织中ASL的mRNA和蛋白质水平也明显高于癌旁组织。2.沉默ASL抑制肝癌细胞增殖、集落形成能力及锚定非依赖生长能力;沉默ASL促进肝癌细胞凋亡。3.ASL沉默促进Bax凋亡通路相关基因的mRNA和蛋白质表达水平,Bax沉默减弱ASL下调对肝癌细胞增殖和凋亡的调控作用。总结:ASL在肝癌细胞和肝癌组织中低表达,ASL沉默可能通过激活Bax信号通路促进肝癌细胞凋亡。