随着石油等传统矿产能源的日益枯竭以及燃烧矿产燃料产生的环境污染问题日益严重,迫使人们开始寻找清洁、可持续利用的替代能源,生物柴油作为可再生清洁能源受到日益广泛关注。用脂肪酶法催化合成生物柴油可以解决化学合成法制备生物柴油的问题,已经受到越来越多的关注。本文主要对脂肪酶产生菌进行了筛选,对产酶发酵条件进行了优化,对酶法催化蓖麻油制备生物柴油的工艺进行了初步研究。以蓖麻油为唯一碳源,经平板初筛、摇瓶复筛及催化转酯反应生产生物柴油的试验,从蓖麻生长的土壤中筛选到一株产生的脂肪酶可以有效催化蓖麻油转酯反应的细菌H-4,根据菌体的形态显微观察和生理生化鉴定,初步鉴定该菌株为假单胞菌（Pseudomonas）。H-4菌株产生的脂肪酶基本酶学性质研究表明:最适作用pH为8.0,最适作用温度为40℃。H-4菌株发酵产酶条件进行优化后的结果为:蔗糖浓度0.6%、豆粉浓度1.5%、（NH₄）₂SO₄浓度0.3%、柠檬酸钠浓度0.1%、MgSO₄·7H₂O浓度0.02%、K₂HPO₄浓度0.4%、KH₂PO₄浓度0.6%、起始pH为8.5、接种量5%、培养温度30℃、摇床转速220r/min、培养60h,测定酶活力为114IU/mL。H-4菌株发酵产生的脂肪酶催化蓖麻油制备生物柴油的较优工艺条件为:以5mL正己烷做溶剂,甲醇1.092g蓖麻油3.408g,（醇油摩尔比为理论反应比例3:1）,6000r/min的条件下用组织捣碎机乳化预处理蓖麻油7min,甲醇分三次加入,每次间隔3h,酶添加量0.65g（21.7%蓖麻油质量）,反应温度42℃,摇床转速150r/min,反应9.5h,生物柴油产率可达85%。