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背景：尽管急性心肌梗死(AMI)的治疗取得了一定进步,但仍面临着诸多挑战。干细胞移植治疗AMI是一种很有潜力的方法,但缺血心肌局部恶劣的微环境严重阻碍了其疗效的发挥。目的：评价地黄低聚糖(RGOs)对同种异体脂肪组织来源干细胞(ASCs)移植治疗小型猪AMI的疗效,探讨其可能的机制。方法：第一部分：热水法提取生地黄中的RGOs,经阳离子和阴离子交换树脂洗脱,活性炭柱层析纯化RGOs,以高效液相色谱法(HPLC)检测其水苏糖含量。第二部分：酶消化法及贴壁法从小型猪腹股沟脂肪组织中分离、培养ASCs,流式细胞仪鉴定其分子表型；CCK-8法观察不同浓度RGOs对ASCs增殖的影响。第三部分：人ASCs(hASCs)经RGOs(0. lmg/ml)预处理12h并继续干预,ELISA法观察不同时间点hASCs培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF),肝细胞生长因子(HGF),胰岛素样生长因子-1(IGF-1),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)浓度的变化。第四部分：过氧化氢(200μM)联合血清饥饿(H2O2/SD,6h)模拟氧化应激微环境,诱导小型猪ASCs凋亡。观察RGOs(0.01mg/ml,0.1mg/ml、1mg/ml、10mg/ml)预处理12h并继续干预对ASCs凋亡的影响。Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,CCK-8法测定细胞活性,酶标仪比色法测定细胞caspase-3的活性,Western-blot法测定细胞Bax、Bcl-2的表达。第五部分：17头小型猪随机分为4组：对照组(C组,n=5),单纯RGOs组(R组,n=4),单纯ASCs移植组(A组,n=4),RGOs+ASCs联合治疗组(RA组n=4)。球囊封堵左前降支90分钟构建小型猪AMI模型,造模1周后(7-10天)经冠状动脉移植异体ASCs(0.8×106/kg)。RGOs组造模前3天及造模后1月饲以RGOs粗提物(4g,2/日)。移植后8周,MRI评价各组心脏结构及功能变化,荧光显微镜及激光共聚焦扫描观察ASCs存活及分化,免疫组织化学法观察梗死区域微血管密度,Masson三色染色法评价梗死区纤维化程度,TUNEL法检测梗死边缘区心肌细胞凋亡,Western blot法测定梗死边缘区心肌细胞Bax、Bcl-2的表达。结果：第一部分：地黄粗提物及提纯物得率分别为地黄原药材的41.64%和35.14%, HPLC法检测RGOs提纯物中水苏糖占31.15%。第二部分：成功从小型猪腹股沟脂肪组织中分离并培养了ASCs,第四代ASCs分子表型CD29、CD44、CD90、CD105呈阳性表达,而CD31、CD34、CD45、 HLA-DR均呈阴性表达。RGOs在一定浓度范围(0. Olmg/ml～lmg/ml)内对体外培养的小型猪ASCs具有促增殖作用,最佳浓度为0.lmg/ml。第三部分：RGOs(0.1mg/ml)可以促进体外培养的hASCs分泌VEGF、HGF、 IGF-1、SDF-1α,但对于bFGF的分泌无明显影响,其促旁分泌作用具有一定的时效性。第四部分：RGOs在一定浓度范围(0.1mg/ml～10mg/ml)可以减轻H2O2/SD引起的ASCs损伤,表现在细胞凋亡率下降,细胞活性增加,caspase-3活性降低,Bax表达下调,Bcl-2表达上调。第五部分：与C组比较,仅RA组可以明显改善左心室功能,增加梗死区室壁厚度,减小左心室质量指数及梗死体积(p<0.05)；RA组ASCs的存活多于A组(p<0.01)；RA组梗死区域微血管密度明显高于其他3组(p<0.01),而3组间无显著差异；与C组比较,A组以及RA组均能明显降低梗死区纤维化程度(p<0.05,p<0.01)；与C组比较,R组及RA组均能明显减少心肌细胞凋亡(p<0.05,p<0.01)；与C组比较,三组Bax的表达均明显下降(p<0.01),R组及RA组Bcl-2的表达明显升高(p<0.01)。结论：RGOs可以提高ASCs移植的效率,其作用机制可能与RGOs改善缺血心肌局部的微环境,促进ASCs增殖、存活,增强ASCs的旁分泌功能及抗凋亡有关。