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本课题选用具有CD44受体靶向作用的透明质酸(hyaluronic acid,HA)作为多糖主链用于疏水化修饰,设计并合成了一系列新型的不同十八烷基取代度的透明质酸接枝十八烷基(HA-C18)聚合物。并在此基础上经叶酸(folate,FA)修饰,合成了叶酸和CD44受体双靶向的FA-HA-C18聚合物。以紫杉醇(paclitaxel,PTX)作为模型药物,应用所合成的HA-C18和FA-HA-C18接枝聚合物,采用自组装技术制备了包载PTX的聚合物胶束给药系统,系统地研究了 CD44受体单靶向的PTX-HA-C18胶束和叶酸与CD44受体双靶向的PTX-FA-HA-C18胶束的制剂学特征、细胞毒性、细胞摄取和内吞机制,以及体内药动学和组织分布行为。采用1H NMR和FTIR技术对合成的HA-C18和FA-HA-C18聚合物的化学结构进行了鉴定。合成的系列HA-C18聚合物中十八烷基的取代度(degree of substitution,DS)为12.7%～19.3%,其临界聚集浓度(critical aggregation concentration,CAC)为 10.0～37.3μg/mL,且随十八烷基取代度的增加而降低。FA-HA-C18聚合物中叶酸的取代度为6.8%,其临界聚集浓度为11.2%。溶血性实验表明HA-C18和FA-HA-C18聚合物是良好的可静脉注射的药用辅料。采用超声方法成功制备了 PTX包载HA-C18和FA-HA-C18聚合物胶束,包封率高达97.3%。对聚合物胶束的制剂学特征进行了考察,结果发现不同十八烷基取代度的PTX-HA-C18 胶束和 PTX-FA-HA-C18 胶束的粒径为 184.8～379.7 nm。HA-C18和FA-HA-C18胶束呈球形,且分布均匀。DSC和X射线衍射测定结果表明PTX是以无定形的状态分散于胶束系统中。采用动态透析法考察了胶束的体外释放行为,结果表明PTX-HA-C18和PTX-FA-HA-C18胶束具有较好的缓释特征,呈近似零级释放行为。选择叶酸和CD44受体高度表达的MCF-7细胞和CD44受体高度表达但叶酸受体表达缺乏的A549细胞作为细胞模型,评价了PTX-HA-C18和PTX-FA-HA-C18胶束的细胞毒性、细胞摄取和内吞机制。体外抗肿瘤活性实验表明相比于Taxol溶液,PTX-HA-C18胶束和PTX-FA-HA-C18胶束在低浓度下表现出了较强的细胞毒性,且在叶酸受体表达丰富的MCF-7细胞中,PTX-FA-HA-C18胶束的细胞毒性显著强于PTX-HA-C18胶束。在细胞摄取实验中,分别采用PTX细胞内摄取定量测定方法,激光共聚焦和荧光显微镜成像技术定性考察了 HA-C18和FA-HA-C18胶束的细胞摄取。定量和定性的细胞摄取实验结果表明胶束系统能显著提高药物在细胞中的摄取量,且细胞摄取呈现浓度、时间和粒径依赖性。相比于CD44受体单靶向的HA-C18胶束,叶酸和CD44受体双靶向的FA-HA-C18胶束表现出更强的细胞摄取能力。叶酸和CD44受体竞争性抑制实验进一步证实HA-C18胶束和FA-HA-C18胶束是借助CD44受体介导的内吞途径有效地摄取进入细胞,而且相比于HA-C18胶束,叶酸受体介导的细胞内吞作用可进一步增强FA-HA-C18胶束的入胞作用。内吞抑制实验表明HA-C18和FA-HA-C18胶束的内吞需要能量,内吞途径包括网格蛋白介导的内吞、细胞膜穴样内陷介导的内吞,以及巨胞饮途径入胞。另外对于FA-HA-C18胶束,叶酸受体介导的内吞途径也参与了胶束的入胞。以MCF-7/Adr为耐药细胞模型,考察了 Taxol溶液,PTX胶束的细胞毒性和细胞摄取情况。结果表明,HA-C18胶束和FA-HA-C18胶束均具有克服多药耐药性的作用。应用超高效液相色谱-串联质谱法研究了PTX-HA-C18和PTX-FA-HA-C18胶束的大鼠体内药动学和小鼠体内组织分布行为。药动学研究结果表明胶束能够显著延长PTX的半衰期,适当增加药时曲线下面积,具有长循环特性。健康小鼠和MCF-7肿瘤小鼠的组织分布研究结果表明PTX-HA-C18和 PTX-FA-HA-C18胶束能够迅速并广泛地分布于各个组织,且显著改变了 PTX在小鼠体内的组织分布特点。胶束在肝、脾和肺中蓄积的药量较Taxol溶液高,在心脏和肾脏中蓄积的药量低于Taxol溶液。在MCF-7肿瘤小鼠中,胶束在肿瘤中蓄积的药量显著高于Taxol溶液。相比于CD44受体单靶向的HA-C18胶束,叶酸和CD44受体双靶向的FA-HA-C18胶束表现出更强的肿瘤蓄积和靶向效果。