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前言结直肠癌是一种常见的致死性肿瘤,每年新增病例数约为100万。结直肠腺瘤是结直肠癌的主要癌前病变,尤其是进展期腺瘤。大约60%～90%的结直肠癌是由结直肠腺瘤演变而来,而由腺瘤发展至癌需要经历大约10-15年的时间。循环miRNA是相当稳定的,室温下放置48小时或经过多次反复冻融后仍可保持稳定。近期文献报道循环miRNA可作为疾病诊断潜在分子标记物。在腺瘤发展为腺癌的过程中,许多miRNA表达异常,所以寻找在结直肠腺瘤-癌序列过程中特异表达的血清miRNA作为非侵入性分子标记物及发现可能参与结直肠腺瘤形成及癌变进展相关miRNA将具有重要的理论意义和实践价值。有利于结直肠腺瘤及腺癌的一级预防；有利于了解结直肠腺瘤癌变的相关分子机制。第一部分Microarray分析结直肠腺瘤-癌序列血清miRNA的表达目的筛选结直肠腺瘤及早癌患者血清中差异表达的miRNA。方法通过TaqMan(?) Human MicroRNA Array检测15例结直肠腺瘤患者、3例结直肠早癌患者和3例健康对照者血清中差异表达的miRNA。结果在变化倍数>2.0或<0.5,P<0.05的条件下进行初步筛选。腺瘤、早癌及正常组三组比较,差异表达的血清miRNAs有21个；腺瘤组与早癌组比较,差异表达miRNAs有15个；腺瘤组与正常组比较,差异表达的miRNAs有16个；早癌组与正常组比较,差异表达的miRNAs有13个；所有腺瘤Ⅰ-Ⅱ级与所有腺瘤Ⅲ级两组比较,差异表达的1niRNAs有12个。在这些差异表达的miRNAs中,与正常组相比,腺瘤组患者血清中准确上调表达为miR-661(P<0.05且FDR<0.05),早癌组患者血清中准确上调表达为miR-591(P<0.05且FDR<0.05);与正常组相比,miR-150-5p在绒毛腺瘤组患者血清中表达上调(P=0.02)；另外,miR-193b-3p、miR-302b-3p在结直肠腺瘤(Ⅰ-Ⅱ)级、腺瘤Ⅲ级、早癌患者血清中表达逐步降低,且腺瘤(Ⅰ-Ⅱ)级与腺瘤Ⅲ级,腺瘤与早癌间表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论21个(包括血清miR-204-5p)可以将腺瘤、早癌、正常对照者两两区分；miR-661、miR-591可能成为结直肠腺瘤和结直肠早癌的非侵入性候选分子标志物；miR-215、miR-193b-3p、miR-302b-3p可能在结直肠腺瘤癌变中发挥作用。第二部分荧光定量PCR验证血清miR-193b-3p、miR-150-5p和miR-204-5p的表达目的荧光定量PCR初步验证结直肠腺瘤-癌序列转化过程中患者血清miR-193b-3p、miR-150-5p和miR-204-5p的表达方法通过Microarray检测15例结直肠腺瘤患者、3例结直肠早癌患者和3例正常对照者血清中差异表达的miRNA。从中筛选出miR-150-5p、miR-193b-3p和miR-204-5p,在42例处于结直肠腺瘤-癌阶段患者和5例正常对照者中,应用实时荧光定量PCR对Microarray检测的这三种niRNA的结果进行验证。对有显著差异的miRNA分析它们与结直肠腺瘤-癌序列患者临床病理特征之间的关系。结果在变化倍数(fold change)>2.0或<0.5,P<0.05的条件下,从Microarray分析结果中筛选出三个miRNAs:腺瘤、早癌、正常对照者三组中差异表达的血清miR-204-5p (P=0.02)；低级别上皮内瘤变组(腺瘤Ⅰ～Ⅱ级)与高级别上皮内瘤变组(Ⅲ级腺瘤+早癌)两组比较差异表达的miR-193b-3p(P=0.01)和绒毛腺瘤与正常对照两组比较差异表达的miR-150-5p (P=0.02)实时荧光定量PCR检测：与正常组比较,血清miR-204-5p在早癌中的表达与Microarry分析结果一致,但在正常对照组、腺瘤组、早癌组三组比较中差异无统计学意义；血清miR-193b-3p、miR-150-5p表达水平与Microarray分析结果一致,但差异无统计学意义(P=0.49)。同时发现,与正常对照组比较,血清miR-204-5p在早癌及进展期腺癌中均低表达,P值分别为0.02,0.01；与腺瘤组相比,niR-204-5p在早癌及进展期腺癌亦低表达,P值分别为0.01,0.002。与正常对照组比较,血清miR-150在进展期腺癌中低表达,差异有显著性(P=0.01)；与早癌组比较,miR-204-5p在进展期腺癌中亦低表达,差异有显著性(P=0.03)。与正常对照组比较,血清miR-193b在腺瘤组中呈低表达,差异有显著性(P=0.02)。结论血清miR-193b-3p、miR-204-5p、miR-150-5p有望分别成为一种非侵入性的筛查结直肠腺瘤、早癌及进展期腺癌的分子标志物；且miR-193b-3p、 miR-204-5p可能在结直肠腺瘤癌变过程中发挥作用,miR-150-5p在结直肠癌发展中发挥作用。