围植入期小鼠子宫内膜形态学及Survivin、VEGF表达的研究

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目的①观察动情期非妊娠及围植入期真孕和假孕小鼠子宫内膜的光镜结构变化特点;②观察动情期非妊娠及围植入期真孕小鼠子宫内膜的超微结构特点;③观察围植入期真孕和假孕小鼠子宫内膜Survivn和VEGF的表达分布状况;④探讨Survivn和VEGF在围植入期真孕小鼠子宫内膜表达的关系。方法以成年未经产雌性昆明种小鼠为研究对象,以动情期雌鼠分别与正常雄鼠和输精管结扎雄鼠3:1合笼,第二天清晨查到阴栓记作真(假)孕1d。分别在3~6d将各60只真孕和假孕小鼠颈椎脱臼处死,剖腹取其子宫并取动情期非妊娠小鼠子宫作对照,4%多聚甲醛固定,分别进行HE染色观察真孕和假孕小鼠子宫内膜的光镜结构变化;电镜观察真孕小鼠子宫内膜的超微结构改变;免疫组化SP法检测子宫内膜Survivn和VEGF的表达;计算机图像分析系统分析HE染色和免疫组化染色结果。结果①HE染色结果,真孕3~6d小鼠子宫内膜呈动态变化趋势,以4~5d固有层中腺体增多,内膜水肿,基质细胞间隙增大,血管增生最为显著。②透射电镜结果,真孕3~6d小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞内细胞器较动情期非妊娠时丰富,4~5d子宫内膜腔上皮和腺上皮内线粒体、粗面内质网、分泌颗粒等丰富,基质细胞肥大变圆,胞质内富含糖原、脂滴。③免疫组化染色结果,真孕3~6d,Survivn主要表达于子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞的胞质中,于5~6d表达最强;VEGF主要表达于子宫内膜腔上皮和基质细胞的胞质中,真孕4~5d表达最强;假孕3~4d,Survivn和VEGF在子宫内膜的表达与真孕组相似,但5~6d表达明显降低。④计算机图像分析系统计算Survivn和VEGF在真孕3~6d子宫内膜表达的平均光密度(MOD)值,经SPSS软件分析,两者在真孕3~6d子宫内膜的表达具有正相关性。结论①真孕和假孕3~6d小鼠子宫内膜形态呈动态变化趋势,以“植入窗”期变化最为显著;②真孕3~6d小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞的胞质中持续表达Survivin,提示Survivin可能在小鼠胚胎的植入过程中发挥重要作用;③真孕3~6d小鼠子宫内膜腔上皮和基质细胞的胞质中持续表达VEGF,提示VEGF可能在小鼠胚胎的植入过程中发挥重要作用;④假孕3~6d小鼠子宫内膜Survivin和VEGF的表达规律,提示Survivin和VEGF的表达不仅受母体激素的影响,也和胚胎刺激有关;⑤Survivin和VEGF在真孕3~6d小鼠子宫内膜的表达具有正相关性,两者协同参与了胚胎植入过程。
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