【摘 要】
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猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)是细小病毒科(Parvoviridae)、细小病毒属(Parvovirus)、食肉动物原细小病毒1型(Carnivore protoparvovirus 1,CPPV-1)种内成员。FPV可感染猫科(Felidae)、灵猫科(Viverridae)、犬科(Canidae)、鼬科(Mustelidae)、浣熊科(Pr
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猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)是细小病毒科(Parvoviridae)、细小病毒属(Parvovirus)、食肉动物原细小病毒1型(Carnivore protoparvovirus 1,CPPV-1)种内成员。FPV可感染猫科(Felidae)、灵猫科(Viverridae)、犬科(Canidae)、鼬科(Mustelidae)、浣熊科(Procyonidae)、獴科(Herpestidae)、猕猴科(Cercopithecidae)和熊科(Ursidae)的多种动物,其宿主范围呈不断扩大的趋势。FPV感染具有强传播力和高死亡率的特点,对野生和圈养的多种动物的健康造成严重威胁。2020年5月,四川成都的4只圈养大熊猫发生腹泻,其中1只死亡。剖检主要观察到各肠段黏膜淤血、出血。病理组织学上,可见全身多组织器官表现出明显的病理损伤,主要表现为变性、坏死与炎症细胞浸润;以非化脓性心肌炎、坏死性-出血性肠炎、淋巴细胞消耗、肝与脾的髓外造血具有特征性。PCR检测患病大熊猫的粪便、组织样本呈FPV阳性,使用F81细胞从大熊猫粪便样品中分离出一株大熊猫源FPV,并命名为AMPV2020。37℃、5%CO2条件下,F81细胞从盲传第3代、4 d开始出现CPE,滴度为10-2.8 TCID50/100μL。进一步的血凝试验证实该病毒在p H 5.7-6.5和p H 6.8时凝集猪红细胞,但不能在p H 7.0和p H 7.2时凝集猪红细胞,血凝效价最高为1∶26(p H 5.9)。AMPV2020感染F81细胞,间接免疫荧光检测呈现FPV抗原的特异性绿色荧光。透射电镜下,在AMPV2020感染F81细胞的细胞质和细胞核中观察到细小病毒样颗粒,并且感染细胞发生凋亡和自噬。纯化病毒后负染,病毒粒子呈圆形,无囊膜,直径约23 nm。完整病毒粒子电子密度低,不完整病毒粒子衣壳呈六角形亮圈。AMPV2020感染1月龄和3月龄幼猫,发病率、病死率均为100%。体重均明显下降,3月龄幼猫体温变化呈现明显的双相热,病程较1月龄长。剖检可见肺淤血,胃肠道空虚、充血、出现溃疡灶。组织病理学上,1月龄幼猫的心肌、肺损伤较3月龄严重;3月龄幼猫的胃肠道损伤较1月龄明显,以空肠的损伤最为严重,表现为隐窝上皮细胞出现广泛坏死;感染猫脾脏、淋巴结均出现淋巴细胞减少等病变。使用Illumina Nova Seq 6000测序和PCR扩增片段测序结合,测序得AMPV2020基因组序列(Gen Bank登录号:MZ712026),全长5277 bp,GC含量为36.76%。该序列包含2个开放阅读框及4个编码序列,编码NS1、NS2、VP1和VP2蛋白。基于基因组与VP2基因系统发育分析发现,AMPV2020与FPV-L分离株、HN-ZZ1分离株和HH-1/86分离株亲缘关系较近。VP2基因上896位核苷酸突变(G→A)导致了VP2蛋白299位氨基酸残基(Gly→Glu)出现了非同义氨基酸替换,该突变株VP2蛋白G299E的特殊突变可能与病毒对大熊猫宿主的适应性相关。死亡大熊猫感染FPV,病理损伤与细小病毒感染引起的损伤相似,在大熊猫粪便样品中分离到AMPV2020毒株,该分离株对幼猫具有高致病性及高致死性,鉴于该FPV变异株(G299E)对大熊猫的威胁,应加强对该突变株的监测与防控研究,以更好保护大熊猫。
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