动脉硬化是一种炎性病变过程，常伴有血浆低密度脂蛋白(LDL)-胆固醇水平的升高。单核／巨噬细胞通过积聚胆固醇酯，继而形成泡沫细胞而在动脉硬化病变的形成中起着重要的作用。对动脉硬化相关基因的研究，如：过氧化物体增殖剂激活的受体γ(PPARγ)，CD36，和脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(aP2)，其目的是为了更好地理解动脉硬化的病理形成过程。 PPARγ是一个与多种生理病理过程有关的核转录因子。在单核／巨噬细胞，PPARγ在CD36结合和内吞氧化的LDL(OxLDL)的过程中，对CD36表达的调节起着重要的作用。OxLDL，反过来，通过激活PPARγ又可以上调CD36的表达。这个正反馈环路使得细胞内不断增加的脂质积累持续进行下去，最终导致泡沫细胞的形成。在脂肪细胞，PPARγ与另一个转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)相互作用、相互配合，诱导脂肪细胞分化及其靶基因(如，CD36和aP2)的激活。aP2在脂肪细胞中 高度表达，并且充当细胞内脂肪酸代谢和转运的往返运载工具。 aPZ也在单核／巨噬细胞中表达，并且它的缺失对高胆固醇血症、（pOE”｝鼠有明显的抗动脉硬化作用。 我们首先观察了“ adipogenic cochail”对巨噬细胞 aPZ表达 的作用。adipogenic cocktail，包括异丁基甲基黄膘吟 （IBM），胰岛素（Ins），和地塞米松（Dex）这三种脂肪细 胞生成诱导剂，常规用于体外诱导脂肪细胞分化。用adipogenic cocktail处理J774巨噬细胞4天，可以明显诱导aPZ InRNA的表 达。在它的三个组成成份中：Dex对诱导aPZ基因的表达是必不 可少的，Ins可以协同增强Dex的作用，而IBMX却桔抗Dex或 Dex和Ins对aPZ的诱导作用（iMX的这一作用与其在脂肪细 胞分化过程中的作用完全相反）。与 aPZ 1lllursn的变化相一 致，Dex也可使 allZ蛋白的表达增加，并伴有细胞对‘忙－油酸摄 取的加强。CD36的表达（和aPZ相同，在脂肪细胞中均可被 adipogenic cocktail诱导增加）在巨噬细胞中与aPZ的变化相反。 另外，在巨噬细胞中，这些脂肪细胞生成诱导剂对 PPAR和 2 C／EBPa的调节与aPZ的变化均不一致。以上这些区别提示， adthegCnic coclhail及其组成成份对巨噬细胞aPZ的调节可能并不 依赖于 PPAR／C／EBPa信号传导通路。 其次，我们又对三苯氧胺厂）在人的单核／巨噬细胞中， 对CD36表达的作用进行了评价。Turn是一种常规使用治疗乳腺 癌的抗雌激素药。除此作用外，它还显示具有与雌激素相互作用 无关的心血管保护作用，其作用机制尚不清楚。我们观察到Turn 及其活性代谢产物羟－三苯氧胺（OH＊）不但可以降低THPl 单核细胞 CD36蛋白表达水平，还可使 OxLDL及 PGJZ诱导的 CD36表达水平下调。同时，通过 RT干CR和 Northern blot还可 观察到与蛋白变化相一致的CD36 rnRNA水平的下降。对其作用 机制的研究显示，Turn和 OH1 均可下调 PPAR的表达，并 可同时增加由磷酸化－p44／42有丝分裂原激活的蛋白（MAP）激 酶介导的PPAR磷酸化。 最后，为了更好地理解PPAR，我们观察了内毒素脂多糖 （LPS）对脂肪细胞oPAR在该细胞中最为丰富，且其功能己 3 被很好地阐述）PPAR的影响。用LPS处理体外培养的3T3工 脂肪细胞，可降低 PPAR InRNA及蛋白的表达。另外，LPS还，可通过激活MAP激酶使PPAR的磷酸化增加。与PP的的变化 相一致，PPAR的靶基因 aPZ和 CD36的表达也明显下降。对于 正向脂肪细胞分化的 3T3工 细胞，LPS可抑制 PPAR蛋白表达 的诱导，降低脂肪细胞生成的速度：细胞内甘油三酯水平及油红 O染色阳性率均明显地低于正常分化的细胞。 总之，通过我们的实验可得到以下结论：l）脂肪细胞生成诱 导剂能够调节巨噬细胞 aPZ的表达，其机制并不依赖于 PPAR和 ／或 C／EBPa信号传导路；2）三苯氧胺通过下调 PPAR表达和激 活 MAP激酶而使 PPAR磷酸化来降低单核／巨噬细胞CD36表 达；3）LPS负性调节 PPAR活性，即抑制和降低 PPAR表达和 促进PPAR的磷酸化，从而减少脂肪生成。