研究背景缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, IR)是指一定条件下恢复缺血区血液灌流后,组织器官的损伤未减轻反而加重的现象,是心肌梗死治疗中普遍存在的问题。研究表明,氧化应激是缺血再灌注损伤的主要机制之一髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)是氧化应激中极其重要的一种酶。MPO由活化的中性粒细胞、单核-巨噬细胞分泌,主要功能为催化H2O2生成氧化活性更强的HOC1,增强机体氧化应激水平。血管过氧化物酶(vascular peroxidase, VPO)是新近发现的存在于心血管系统的过氧化物酶家族成员。体外实验证明VPO具有MPO类似的特性,能将H2O2转化成为HOC1,推测其可能在氧化应激中发挥重要作用。间苯三酚(Phloroglucinol)具有抗炎抗氧化作用,能抑制过氧化物酶活性,且能增加过氧化氢酶(catalase, CAT)——一种H2O2水解酶的活性。本实验将探讨间苯三酚对缺血-再灌注损伤的作用及机制。方法缺血前30 min用间苯三酚15mg/kg或30mg/kg灌胃预处理大鼠,结扎左冠状动脉前降支1 h,再灌注3 h。实验分为假手术组、缺血-再灌注组、缺血-再灌注+间苯三酚低、高剂量组以及溶媒对照组。TTC染色法测量心肌梗死面积；HE染色法检测组织损伤情况；免疫组织化学方法检测Caspase-3蛋白表达水平；TUNEL检测心肌细胞凋亡情况；比色法检测血清肌酸激酶(creatine kinase, CK)、Caspase-3活性、血液、心肌组织中MPO活性及CAT活性；酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆及心肌组织MPO蛋白水平。H9C2心肌细胞株于95%N2、5%CO2、低氧培基缺氧24 h,然后改为95%空气、5%CO2、常氧培基复氧12 h,复氧前给予浓度分别为10-10M、10-9M、10-8M的间苯三酚处理。实验分为常氧组、低氧-复氧组、低氧-复氧+间苯三酚低、中、高浓度组及溶媒对照组。Hoechst染色检测心肌细胞凋亡；化学法检测心肌细胞中VPO活性；RT-PCR检测VPO1 mRNA表达。结果结果表明,与假手术组比较,缺血-再灌注处理可导致危险区梗死面积比上升至43.5±3.7%伴CK活性增加,心肌细胞坏死、凋亡明显增加,血液、心肌组织中MPO活性和含量均不同程度升高而过氧化氢酶活性显著降低。间苯三酚预处理可显著减少心肌细胞凋亡、缩小心肌梗死面积、降低CK活力,同时抑制MPO活性、降低MPO蛋白水平并明显增加血浆及心肌组织中CAT活性。与常氧组比较,低氧-复氧组细胞凋亡显著增加、VPO活性增强、VPO1 mRNA表达上调,10-9M、10-8M间苯三酚预处理能显著减少细胞凋亡、降低VPO活性。结论间苯三酚对大鼠心脏缺血-再灌注损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抑制VPO、MPO活性,增强CAT活性有关。