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本实验采用链脲佐菌素性糖尿病大鼠模型,用均匀设计的方法设计不同配比的二甲双胍复方给药方案,以血糖和眼晶状体山梨醇含量为指标,筛选确定出二甲双胍复方的最佳配比。当以空腹血糖值为指标时,应用均匀设计数据处理软件分析数据,可以得出理论上二甲双胍与盐酸黄连素配比为200:60时可以达到最好的降糖效果,理论血糖值为7.24 mmol/L。回归方程为Y=15.7242+0.1098X1-0.0547X2-0.0008X1X2;F=8.0836,R2=0.9566,可以通过F检验(α=0.10)。当以眼晶状体内山梨醇含量为指标时,同法得出回归方程为Y=-0.1948+0.0604X1+0.0413X2-0.0002X1X1+0.0002X2X2,F=9.9284,R2=0.9642,二甲双胍和盐酸黄连素配比为60:130时,Ymin=3.40mg/glens。由于本复方药物主要针对于糖尿病并发症,所以应该以眼晶状体内山梨醇含量作为主要的指标来确定最佳配比,从降糖和抑制醛糖还原酶两方面考虑,二甲双胍与盐酸黄连素的最佳配比为60:130。 用链脲佐菌素造成糖尿病大鼠模型,考察用上述筛选出的二甲双胍复方进行干预治疗的效果。结果发现,模型大鼠体重明显减轻,饮水量、进食量、排便量及排尿量明显增加,血糖、糖化血清蛋白显著升高。本文用痛觉潜伏期、大鼠尾神经传导速度、坐骨神经病理组织学变化来考察药物对糖尿病大鼠神经病变的作用;用晶状体内山梨醇含量、晶状体混浊程度来评价药物对糖尿病性眼晶状体病变;用肾指数、血清尿素氮及肾脏病理组织学变化评价药物对糖尿病性肾脏的病变;用血液中TG、CHO、HDL-C和LDL-C的含量以及动脉血管的病理组织学变化考察药物对糖尿病所致脂类代谢紊乱和血管病变的作用。实验结果表明,复方二甲双胍对糖尿病大鼠神经病变、肾脏病变、眼病变及脂类代谢紊乱和血管病变均有明显的对抗作用。 本文建立了衍生化RP-HPLC法测定眼晶体内山梨醇含量,山梨醇标准曲线方程为A=683573C(μg)+587424(r=0.9994),山梨醇测定的稳定性试验和精密度试验的变异系数分别为2.9%和2.2%。此方法可方便地用于糖尿病并发症病理进程的监测。