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黑松(Pinus thunbergii)、赤松(P. densiflora)是重要的松类针叶树种。黑松和赤松等松类树种间存在着种间杂交现象。本研究以6份黑松单株、8份赤松单株和16份黑松、赤松混交林的自然更新幼树为试材,PCR扩增获得了其ITS11序列区和cpDNA中的trnL-F序列区,分析了这些序列的特点,以期为黑松、赤松遗传进化和亲缘关系分析提供借鉴。主要研究结果如下:1、共获得12个ITS1序列,其G+C含量为48.7%-52.6%,平均G+C含量为50.6%,所有序列间有72个差异位点,有166个缺失位点。获得的29个trnL-F序列G+C含量为49.7%-54.6%,平均G+C含量为51.3%,包括506个变异位点,799个缺失位点。2、12个ITS1序列样品中有8个样品(黑松HZ2、HZ3、HZ4、HZ5,赤松CT5,自然更新幼树HC2、HC4、HC6)的比对结果没有特异性位点。另外4个样品(黑松HZ1;赤松CT7;自然更新幼树HC1、HC3)在第224个位点上出现G/A粘合性重叠。trnL-F序列在29个样品中测得5个差异位点,包括4个碱基替换位点和1个碱基插入或缺失位点。3、由ITS1序列构建的系统发育树,trnL-F序列构建的系统发育树,都将黑松HZ1、HZ4,赤松CT7,自然更新幼树HC1、HC3(A组)与黑松HZ3、HZ5,赤松CT5,自然更新幼树HC2、HC4、HC6(B组)聚合到了一起,且支持率大多在82%以上。ITS序列间的Kimura2-parameter进化距离范围在0.000-0.612。 trnL-F序列间的Kimura2-parameter进化距离范围在0.000-1.025。A、B两组间的进化距离均小于0.037。在ITS1序列与trnL-F序列的系统发育树中,黑松、赤松及自然更新幼树的个别单株会聚在同一分枝,在ITS1序列与trnL-F序列均存在着差异位点和信息缺失位点,这表明黑松、赤松ITS1序列和trnL-F序列在单株间存在多态性,差异位点的存在也为黑松、赤松及其杂种的分子鉴定提供了可能。