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蛋白质在固液界面上的吸附对生物相容性材料研究、新型诊断试剂盒开发以及蛋白质分离等众多领域都有重要意义,一直备受关注。差分流动电势法是一种快速、灵敏、简便的测量微通道表面电荷状况的技术,在一定pH和电导率条件下,蛋白质在微通道壁上的吸附会引起通道表面电荷的改变,从而影响到毛通道两端流动电势值的大小,因此可以用监测流动电势值的改变来间接分析蛋白质在微通道壁上的吸附情况,一定条件下可用于定量测定溶液中蛋白质的含量。该方法无需标记蛋白,在进行免疫分析时,不仅能最大限度地保持抗体或抗原的活性,同时还能简化分析步骤,缩短分析时间,在蛋白质分析领域具有较大的应用前景。本论文在前人的基础上,以差分流动电势测量为手段,开展了以下三方面的研究：1.搭建了新型脉冲式差分流动电势测量装置并对其适用性进行了测试。在此基础上,分别研究了四种不同蛋白在熔融石英毛细管表面的吸附行为,从蛋白吸附时流动电势达到平衡值所需时间长短和缓冲液冲洗蛋白质层前后流动电势的变化量大小两方面考察了蛋白质在毛细管上的结合能力,并将结论应用于异硫氰酸酯(FITC)标记的蛋白的吸附检测中。实验测试了溶菌酶(LYZ)和牛血清白蛋白(BSA)在不同吸附时间后的解吸附行为,据此对LYZ吸附时出现的"Overshoot"现象作出了解释。与此同时,实验还得出了这四种蛋白在pH=4、7、9条件下的吸附速率,最后对流动电势值和蛋白吸附量之间的关系作了初步讨论。实验结果证明利用流动电势测量法研究蛋白质在毛细管内壁的吸附具有方法简便、样品试剂消耗量小、测试速度快、应用范围广等优点。2.在对单种蛋白吸附研究的基础上,研究了混合蛋白在石英毛细管表面的吸附行为。实验采取顺序吸附和同时吸附两种方法对三组常见蛋白进行了测试,由测得的结果得出BSA和牛纤维蛋白原(BFG)在表面竞争吸附时存在取代关系,BSA-LYZ和蛋白A(Protein A)-免疫球蛋白(IgG)之间均存在相互作用,它们可以在表面形成蛋白复合物,实验通过数学推导分别得到了这两组蛋白相互作用时的结合平衡常数。实验结果表明简便快速的流动电势测量法有望成为研究蛋白质相互作用的一种新方法。3.实验通过戊二醛法将神经元特异性烯醇化酶NSE成功固定在毛细管表面,用具有抗蛋白吸附性能的聚乙烯醇(PVA)涂层毛细管表面,并用牛血清白蛋白(BSA)对表面进行双重封闭,以防止蛋白质在表面的非特异性吸附。在此基础上,尝试了抗体anti-NSE的非标记定量测定,实验结果显示,在2×102-2x105倍其它蛋白物明显的干扰下,anti-NSE的浓度在10-900ng/mL区间内与流动电势值呈明显的线性关系,该方法被用于实际人血液样品中anti-NSE的测定,结果显示正常人体血液中该抗体的含量为160ng/mL。