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目的：卵巢癌对化疗的多药耐药性(multidrug reistance，MDR)是化疗失败的主要原因，也是提高卵巢癌五年生存率面临的难题之一。多药耐药是指，肿瘤细胞先天存在的或经化疗药物治疗后产生的对所用药物以及结构和作用机制完全不同的其他药物产生交叉耐药的现象。目前研究发现，多药耐药并非单一机制所致，而是基因、蛋白质、脂类等各种细胞组成成分和药物的摄取、转运、解毒、细胞凋亡、信号传导等多种细胞功能改变所致的结果。近年来，部分国内外学者开始关注中性鞘糖脂在耐药中的作用。本课题选择P-gp表达阴性、对DDP(顺铂)耐药的卵巢上皮癌细胞株COC1／DDP及其亲本敏感细胞株COC1为研究对象，研究中性鞘糖脂CMH(单己糖神经酰胺)、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax与耐药的关系，以及经逆转剂mifepristone逆转耐药后，细胞中CMH、Bc1-2、Bax的表达以及凋亡的变化，初步揭示了CMH、Bcl-2、Bax在卵巢上皮癌细胞COC1／DDP耐药中的作用，为卵巢癌治疗和耐药逆转方面提供新思路和体外实验依据。方法：实验采用流式细胞仪检测敏感细胞株COC1和耐药细胞株COC1／DDP凋亡相关蛋白 Bcl-2、Bax的阳性率；不同浓度的mifepristone对耐药细胞株COC1／DDP Bc1-2和Bax表达的影响。改良的Hakamori方法分别提取、纯化耐药细胞株COC1／DDP和敏感细胞株COC1的中性鞘糖脂，高效薄层层析(HPTLC)、凝胶光密度成像系统分析两者CMH的差异；耐药细胞株COC1／DDP经mifepristone处理后，CMH的变化。MTT法检测耐药细胞株COCI／DDP的耐药性，mifepristone对 COCUDDP的增敏作用。透射电镜观察 COC／DDP细胞株经mifepristone处理前后细胞形态学的变化。DNA凝胶电泳观察COCI＊DP耐药细胞株经mifepristoen作用后，DNA梯状凋亡带的产生。统计软件 SPSS 8．0对数据进行 t检验或方差分析或析因分析。 结果：耐药细胞株COCI／DDP B。12阳性率为 23．sl％士0人4％，明显高于 COCI细胞的 0．88oto．07o（P＜0．001）。而 Bax的表达相反，COCI／DDP的阳性率12．75o土0．60o低于COCI的阳性率15．42o土0．25％（Pro刀5）。经浓度为 二．25＊mol／L、sumollL mlfeprlstone分别处理后的耐药细胞株COCI／DDP 的Bcl．2 的阳性率分别下降到19．40％土0石9％和14．23％土0．44％（尸＜0刀of），Bax分别上升到25石0％士0．88％和 33．89％士0．28％（P＜0刀of人 CMH的百分含量，耐药细胞株 COCI0DP 37．14％土3．34％，明显高于敏感细胞株 COCI 14．05％士 l．440（P＜0．001）。经浓度为 l．25 n mol／L、5．0 n mollL mifepristone分别处理后的耐药细胞株COCI／DDP的CMH分别为26．62O士2．63o （P＜ 0．05）、17．50％士0．67％（Prto．001）。mifepristone的细胞毒性实验显示它的浓度在 1．25～5 n mol／L时，对 COCI／DDP耐药细胞株无明显抑制作用，浓度在 10 u mol几 以上时，将抑制细胞生长。COCI／DDP耐药细胞株对 DDP的生存率曲线显示 mifepristone．25 nmol／L的低浓度即能使曲线下降（P＜0．05），浓度为 5 u mol／L时下降程度更大（P＜0．001人经mifepristone和DDP共同处理的COCI／DDP细胞，绝大部分细胞出现了典型的凋亡形态：细胞变圆，微绒毛脱落，胞浆浓缩，内质网扩张成泡状，染色质浓缩呈新月状、凝聚在细胞膜周边，形成多个凋亡小体。琼脂糖凝胶电泳出现了梯状的DNA条带。而单用相同浓度的 DDP处理或 mifepristone处理的 COC／DDP细胞，则观察不到上述细胞的凋亡形态，琼脂糖凝胶电泳也不出现梯状的DNA条带。 结论：l、卵巢癌耐药细胞株COCI／DDP和其亲本敏感株COCI在凋亡相关蛋白BclZ、Bax的表达上存在明显差异。2、与亲本敏感细胞比较，COCI／DDP的中性鞘糖脂CMH显著升高。3、mifepristone — —2——可增强COCI／DDP对DDP的敏感性，促进细胞凋亡。4、COCI／DDP耐药性经mifepristone逆转后，凋亡相关蛋白Bax表达增强，BcIZ表达减弱，中性鞘糖脂CMH受抑制。