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目的通过对兔后肢膝关节不同时间的制动以及解除制动后不同时间的自由活动,观察不同的制动时间对兔膝关节软骨损伤、关节僵硬以及损伤后康复的影响。方法49只雄性新西兰白兔,年龄6.5~7.0个月,体重3.0~4.0kg,双侧膝关节活动范围均在:(屈曲)148°~150°,(伸直)-5°~-7°。所有实验动物双侧膝关节均无外伤及肿胀,抽屉试验(-),侧方应力实验(-)。根据随机数字表法将所有实验动物随机分为七组(每组7只):制动4周组(A1组)、制动4周活动4周组(A2组)、制动4周活动8周组(A3组)、制动6周组(B1组)、制动6周活动4周组(B2组)、制动6周活动8周组(B3组)、对照组(C组)。采用医用石膏绷带制作成管型石膏将兔左后肢从腹股沟至踝关节下5~8cm固定,膝关节固定于伸直0°位,踝关节固定于跖屈60°位。A1组、A2组和A3组制动4周,B1组、B2组和B3组制动6周,A2组和B2组解除石膏后自主活动4周,A3组和B3组解除石膏后自主活动8周,C组不做任何处理。每组随机选取1只,取其左侧后肢膝关节股骨内侧髁,通过HE和番红“O”染色观察软骨组织学形态,另外6只测量左后肢膝关节活动范围后处死,观察软骨大体形态并刮取股骨髁及胫骨平台软骨,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法测定膝关节软骨细胞中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的含量。采用SPSS13.0软件进行多组定量资料的方差分析和均数两两比较的LSD-t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)与对照组相比,制动4周组和制动6周组膝关节活动度均明显减小(P<0.01),制动6周组活动度小于制动4周组(P<0.01);与制动4周组相比,制动4周活动8周组膝关节活动度增加(P<0.01);与制动6周组相比,制动6周活动8周组膝关节活动度增加(P<0.01);制动6周活动8周组膝关节活动度小于制动4周活动8周组(P<0.01);制动6周活动8周组和制动4周活动8周组膝关节活动度均明显小于对照组(P<0.01)。(2)大体及组织学染色观察发现,制动后膝关节软骨表现为退行性改变,解除制动并自由活动后软骨退行性变均有不同程度的逆转。(3)与对照组相比,制动4周组和制动6周组膝关节软骨细胞对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达均明显减少(P<0.01),且制动6周组表达明显低于制动4周组(P<0.01);与制动4周组相比,制动4周活动8周组膝关节软骨细胞对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达明显增加(P<0.01),但前者与制动4周活动4周组之间无显著性差异(P>0.05);与制动6周组相比,制动6周活动8周组膝关节软骨细胞对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达明显增加(P<0.01),但前者与制动6周活动4周组之间无显著性差异(P>0.05);制动6周活动8周组膝关节软骨细胞对Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA的表达仍低于对照组(P<0.01),但后者与制动4周活动8周组之间无显著性差异(P>0.05)。结论膝关节软骨损伤的程度随关节制动时间的延长而加重,短期制动造成的软骨损伤在解除制动并活动一定时期后可自行修复,修复速度随制动时间的延长而减慢。