GAPLINC通过与PSF和NONO结合靶向调节SNAI2促进结直肠癌肿瘤细胞侵袭

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结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是全球最常见的恶性肿瘤之一,全球每年新增病例约130万,肿瘤转移是结直肠癌患者治疗失败的主要原因。长链非编码RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)被证实与肿瘤转移有着密切的联系,但目前1ncRNA在结直肠癌转移过程中的作用尚不明确。本文拟探索结直肠癌转移相关的关键lncRNA及其在结直肠癌转移中的作用和相关机制。我们利用lncRNA芯片技术在结直肠癌转移阳性淋巴结与阴性淋巴结之筛选出1133条差异表达的lncRNA,生物信息学分析发现GAPLINC(gastric adenocarcinoma predictive long intergenic noncoding,GAPLINC)可能与肿瘤相关通路相关,于是我们将其作为进一步研究对象。我们通过原位杂交技术检测GAPLINC在180对结直肠癌肿瘤及癌旁组织中的表达,发现GAPLINC高表达与结直肠癌肿瘤大小,肿瘤分期(T分期),淋巴转移(N分期)及临床预后密切相关。我们将结直肠癌细胞株中的GAPLINC敲低,体外细胞的增殖和侵袭能力受到明显抑制,裸鼠皮下成瘤能力也受到抑制。我们采用RNA pulldown联合蛋白质谱技术筛选出与GAPLINC相结合的主要蛋白PSF(PTB-associated splicing factor,PSF)和 NONO(non-POU-domain-containing octamerbinding,NONO),干扰PSF和NONO可以逆转GAPLINC的促结直肠癌侵袭过程,然而PSF和NONO的mRNA及蛋白水平并不受GAPLINC影响。最后,基因表达谱及蛋白印记实验发现靶蛋白SNAI2(snail family zinc fnger 2,SNAI2)参与GAPLINC/PSF/NONO的生物调节过程。我们的研究表明,GAPLINC与结直肠癌转移及预后密切相关,并可通过与PSF和NONO结合调节SNAI2表达促进结直肠癌肿瘤细胞侵袭过程。
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