背景和目的：一直认为，流感病毒感染的初始阶段是其外壳上的血凝素（Hemagglutinin,HA）结合到宿主细胞膜上的唾液酸受体再引发一系列入胞过程，其中包括巨胞饮途径。而细胞内SNX5蛋白又与巨胞饮有关。唾液酸受体的多样性决定了病毒感染的特异性，人流感病毒结合α-2,6唾液酸受体，可通过植物凝集素SNA染色辨别。而禽流感表达则结合α-2,3唾液酸受体，被植物凝集素MAAI、MAAII染色辨别。人流感病毒能否感染只存在禽流感病毒受体的CHO-K1细胞，以及SNX5是否能够与巨胞饮介导的病毒感染过程有关还有待确定。因此，本研究将针对这两个问题进行相关研究。　　材料与方法：　　1.唾液酸受体表达研究：将三种植物凝集素SNA、MAAⅠ和MAAⅡ分别与CHO-K1细胞孵育过夜，经辣根过氧化物酶标记的链霉卵白素结合后，AEC显色。　　2.siRNA下调SNX5效率的检测：设计RNA干扰序列，将干扰试剂与CHO-K1细胞共孵育一段时间后利用实时定量PCR和免疫蛋白印迹检测SNX5下调情况。　　3.吞噬实验：将FITC标记的右旋糖酐与SNX5下调后的CHO-K1细胞共孵育一段时间后利用流式细胞术检测内吞颗粒。　　4.免疫荧光检测CHO-K1细胞内SNX5蛋白与病毒分布情况：将CHO-K1细胞与SNX5蛋白流感病毒NP蛋白抗体孵育，用已感染的CHO-K1细胞爬片进行免疫荧光检测，观察细胞SNX5蛋白与流感病毒在细胞内的定位。　　5.免疫荧光检测CHO-K1细胞吞噬的FITC-Dextran与感染的病毒分布情况：在流感病毒感染CHO-K1细胞时同时加入FITC-Dextran，用已感染的CHO-K1细胞爬片进行免疫荧光检测，观察细胞吞噬的右旋糖酐与流感病毒在细胞内的定位。　　6.人流感病毒感染CHO-K1细胞：使用的病毒为A/Nanchang/8002/2009(H1N1)，设置不同时间段收取细胞，进行后续实验检测，以了解病毒复制感染情况。　　7.人流感病毒基因复制检测：CHO-K1细胞感染后，提取其总RNA，进行反转录后，进行先提取感染后的CHO-K1细胞总RNA，逆转录后使用荧光定量PCR的方法检测人流感病毒保守基因基质蛋白M1的表达情况，从而分析CHO-K1细胞内流感病毒的复制情况和感染情况。　　8.人流感病毒蛋白合成检测：CHO-K1细胞感染后，收取细胞，提取总蛋白，利用免疫印迹的方法检测感染后的CHO-K1细胞内流感病毒核蛋白NP的相对表达量。　　结果：　　植物凝集素特异性染色结果显示，CHO-K1细胞与植物凝集素MAAI和MAAII孵育后，细胞膜表面呈阳性信号，表明CHO-K1细胞膜上存在α-2,3唾液酸受体。但与植物凝集素SNA共孵育后，则呈阴性信号，表明CHO-K1细胞不存在人流感α-2,6唾液酸受体。　　利用RT-PCR检测siRNA下调效率，与对照组相比，siRNA干扰过后的CHO-K1细胞内SNX5基因表达量减少约70％。通过流式细胞仪检测发现，SNX5下调后的CHO-K1细胞通过巨胞饮吞噬的右旋糖酐含量下降，说明其吞噬能力减弱。利用人流感病毒感染SNX5下调后的CHO-K1细胞，再用RT-PCR和免疫印迹检测病毒基质蛋白基因表达量及流感病毒核蛋白，显示其表达量与对照组有显著差异。　　结论：　　1.CHO-K1细胞膜仅仅存在禽流感病毒α-2,3唾液酸受体，没有人流感病毒α-2,6唾液酸受体；　　2.人流感病毒H1N1可以感染缺乏α-2,6唾液酸受体的CHO-K1细胞，并可在细胞内复制；　　3.SNX5影响CHO-K1细胞的巨胞饮作用；　　4.SNX5参与调控人流感病毒感染CHO-K1细胞的过程。