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[目 的]年龄相关性黄斑变性(ARMD)是发生在视网膜黄斑区的退行性改变,视网膜色素上皮(RPE)细胞的凋亡是其明显标志。本研究旨在评估从大蒜中提取出来的—种生物活性成分——S-烯丙基-L-半胱氨酸(S-allyl-L-cysteine,SAC)保护RPE细胞免受对二苯酚(HQ)诱导凋亡的效果,并研究其潜在机制。[方 法](1)用HQ诱导细胞凋亡,经过24 h、48 h和72 h处理后,以CCK-8法分别检测其细胞活力;(2)分别用2 μM、10μM、50μM、250 μM和1250 μM浓度的SAC处理细胞,48 h后,以CCK-8法检测细胞活性;(3)将细胞分为3组,CTRL组:不做任何处理;HQ组:用HQ诱导细胞凋亡;实验组:分别用2 μM、10μM、50 μM、250μM和1250 μM浓度的SAC预处理细胞2小时,之后加入HQ诱导细胞凋亡,用CCK-8确定SAC的最佳浓度;(4)将细胞分为4组,CTRL组:不做任何处理;HQ组:用HQ诱导细胞凋亡;SAC组:单纯用SAC处理细胞;实验组:先用50 μM的SAC预处理细胞2小时后加入HQ诱导细胞凋亡,用流式细胞仪和TUNEL染色来观察各组细胞的凋亡情况;(5)同上,将细胞分为四组,用倒置相差显微镜观察各组间的细胞形态学变化,并进行比较;(6)同上,将细胞分为四组,应用流式细胞仪和倒置荧光显微镜测定各组间活性氧(ROS)的产生量,并进行比较;(7)同上,分为四组,用Western印迹法检测各组间的抗氧化因子核因子2相关因子2(Nrf2)的蛋白水平表达变化,及其下游抗氧化基因磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1(NQO-1)、血红素氧化酶-1(HO-1)和超氧化物歧化酶-1(SOD-1)、超氧化物歧化酶-2(SOD-2)的蛋白水平表达变化,并进行比较。[结 果](1)CCK-8检测到HQ显著降低了细胞活力,且随着时间的延长,细胞活力逐渐下降;(2)细胞经过不同浓度SAC的处理后,通过CCK-8的结果分析出细胞活力并未出现显著改变;(3)经过SAC预处理后,与单纯HQ诱导细胞凋亡组相比,细胞活力降低显著改善,差异有统计学意义,通过CCK-8确定50μM SAC为最佳药物保护浓度;(4)流式细胞仪和TUNEL染色检测到HQ诱导细胞凋亡,而单纯经过SAC处理的细胞未出现凋亡。当先用SAC预处理细胞,再用HQ处理细胞时,细胞凋亡得到缓解,差异有统计学差异;(5)通过倒置相差显微镜观察到,SAC组与CTRL组相比,细胞形态未发生改变;HQ组与CTRL组相比,贴壁细胞明显减少,细胞出现特征性的凋亡形态;经过SAC的预处理后,实验组中的凋亡细胞数与HQ组相比显著减少;(6)通过流式细胞仪和倒置荧光显微镜检测发现,HQ组与CTRL组相比ROS的生成显著增加;单纯SAC处理组未有明显改变;SAC预处理的实验组与HQ组相比,其ROS的生成量显著降低,差异具有统计学意义;(7)通过蛋白印迹法检测发现,细胞在HQ刺激下会增强自我保护,而引起抗氧化因子蛋白水平的上调,但是经过SAC的预处理后,各抗氧化基因的蛋白水平上调明显减弱,差异具有统计学意义。[结 论]研究结果表明,SAC可以有效地减轻HQ诱导的人RPE细胞的氧化损伤,证明了 SAC可以保护RPE细胞免受HQ诱导氧化损伤而引起的凋亡,从而为ARMD的预防提供新的见解。