胃癌BGC-823细胞中HIF-1α、HIF-2α对GLUT1、PKM2的调控作用

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目的:检测HIF-1α、HIF-2α、GLUT1、PKM2在胃癌BGC-823细胞中的表达情况,研究siRNA技术特异性沉默人胃癌BGC-823细胞中缺氧诱导因子(HIF-1α、HIF-2α)后葡萄糖载体蛋白-1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)的蛋白及mRNA表达情况,探索HIF-1α、HIF-2α对胃癌细胞内GLUT1、PKM2的调控作用。方法:实验总共分为4组,分别是对照组、转染Control siRNA组、转染HIF-1αsiRNA组、转染HIF-2αsiRNA组,利用实时荧光定量RT-PCR法及Western-blot法检测转染HIF-1αsiRNA、HIF-2αsiRNA及Control siRNA后细胞内GLUT1、PKM2蛋白及mRNA的表达情况。结果:利用RNA干扰技术能有效沉默BGC-823细胞中的HIF-1α、HIF-2α蛋白及mRNA的表达。转染HIF-1αsiRNA、HIF-2αsiRNA后细胞内GLUT1、PKM2在mRNA及蛋白表达水平均下降(P<0.05),其中siRN A抑制HIF-1α后PKM2下调较siRNA抑制HIF-2α更明显(P<0.05),HIF-1α、HIF-2α对GLUT1的调控比较差异结果无明显统计学意义(P>0.05)。结论:研究结果提示HIF-1α和HIF-2α均可在转录及翻译水平参与调控GLUT1、PKM2的表达,其中HIF-1α对PKM2起到主要调控作用,HIF-1α、HIF-2α与GLUT1、PKM2共同作用,在促进胃癌细胞的Warburg效应和促进肿瘤恶性表型方面起重要作用。
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